石蠟切片厚4～6μm，撈片于多聚賴氨酸防脫水劑中，60℃烘烤30min～60min，再脫蠟、脫水。這個(gè)處理過程的關(guān)鍵是要保證梯度二甲苯和酒精的濃度，使組織脫蠟、脫水干凈徹底，否則，水洗后切片含有“油珠”，呈云霧狀，沖洗不干凈，致使抗體在組織上分布不均，導(dǎo)致染色效果不佳。我科的方法是:普通常規(guī)染色所用的梯度二甲苯和酒精與免疫組織化學(xué)染色所用的梯度二甲苯和酒精分開，并且定期更換液體。在二甲苯脫蠟時(shí)，二甲苯I和II脫蠟時(shí)間不少于半小時(shí)，梯度酒精各5min左右。如在室溫較低時(shí)，應(yīng)將梯度二甲苯放于恒溫箱中提前預(yù)熱，梯度酒精時(shí)間延長，保證組織的充分脫蠟脫水。病理實(shí)驗(yàn) 免疫熒光,HE染色服務(wù)實(shí)驗(yàn)找融享生物。江蘇免疫學(xué)免疫組化機(jī)構(gòu)哪家好

物質(zhì)所具有的抗原性主要由分布在抗原表面的抗原決定簇決定。固定液的固定對免疫組化的正確結(jié)果極其重要，此液能使抗原保存良好。抗原修復(fù)的好壞直接影響著免疫組化檢測結(jié)果的可靠性。在進(jìn)行免疫組化時(shí)并非所有的抗原都要進(jìn)行抗原修復(fù)，抗原性保存良好或基本保存者不需要修復(fù)。目前抗原修復(fù)的方法主要有蛋白酶消化法、硼氫化鈉（NaBH4）修復(fù)法和熱修復(fù)法。較常用的是熱修復(fù)法，尤其是細(xì)胞核抗原經(jīng)熱修復(fù)后，其染色效果特別好。熱修復(fù)包括單純加熱、高壓加熱和微波加熱3種,其原理是以熱效應(yīng)來引導(dǎo)抗原決定基重新暴露。熱修復(fù)法影響抗原修復(fù)的關(guān)鍵因素有兩個(gè)：一是溫度,至少要達(dá)到100 ℃,時(shí)間3～15 min;二是修復(fù)液的pH值為7.5～8.5。所以我們必須清楚影響抗原的因素及各種抗原修復(fù)的方法，嚴(yán)格按照抗體說明書進(jìn)行抗原修復(fù)。鑒于抗原修復(fù)的方法較多，在實(shí)際工作中，究竟選用何種抗原修復(fù)，應(yīng)根據(jù)抗體種類予以選擇，必要時(shí)可以多種方法同時(shí)使用，這樣使其更具有針對性，標(biāo)記結(jié)果更理想。組化染色結(jié)果有很大影響。江蘇免疫學(xué)免疫組化機(jī)構(gòu)哪家好病理實(shí)驗(yàn)免疫組化專業(yè)設(shè)備，真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

免疫組織化學(xué)（Immunohisochemistry）檢測技術(shù)曾被公認(rèn)為病理學(xué)發(fā)展史上的第二個(gè)里程碑，此項(xiàng)技術(shù)發(fā)展到現(xiàn)在，較好充實(shí)了病理學(xué)的內(nèi)容，使病理診斷結(jié)果更精確，將病理學(xué)提高到了形態(tài)和功能相結(jié)合的水平。免疫組織化學(xué)方法的敏感性和特異性直接影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。近兩年來，在本科同志的配合下，筆者已做免疫組化420例，取得了很好的效果，并且明顯的提高了診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，支持了對臨床病人的診療。現(xiàn)提出以下五點(diǎn)供同道借鑒

    —20℃）凍存——應(yīng)選較佳稀度凍存。③若工作濃度大于1∶500則要先將原液稀釋十倍，而后分裝10μl/瓶→凍存（-20℃）于冰箱備用。④關(guān)于Ab保存應(yīng)參照說明書。（3）Ab濃度的選擇Ab濃度不可太高或太低，因?yàn)锳g-Ab結(jié)合需在一定濃度范圍內(nèi)進(jìn)行，若一方過剩則形成復(fù)合物小且少；極過剩時(shí)已形成的復(fù)合物亦會(huì)解體而呈現(xiàn)假陰性。——并非Ab濃度越高越好。3．Ab滴片技術(shù)——所滴的抗體應(yīng)與切片上的組織剛好吻合。[注意]滴抗體前需把切片上的水弄干，但不能干片。要領(lǐng)：甩凈組織周圍的水。4．PBS洗滌技術(shù)（1）洗滌的目的①保證離子濃度和PH值。②減少非特異反應(yīng)（平時(shí)Ab不可靠很純）（2）方法：洗三次，每次5分鐘。5．Ab孵育技術(shù)（1）必須在濕盒內(nèi)進(jìn)行，以防抗體的蒸發(fā)和干片。（2）溫度與時(shí)間4℃：過夜；37℃：2hor參考說明書6．光鏡控制顯色方法（1）室內(nèi)操作：注意溫度與時(shí)間的關(guān)系，室溫較宜5分鐘。（2）染色稍淺亦可拿出，脫水，封片后顏色可加深。對照組和染色結(jié)果的評價(jià)從以下幾個(gè)方面綜合評價(jià)：1．陽性染色特點(diǎn)①Ag定位，胞漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。（非特異性～細(xì)胞與組織無區(qū)別）②染色強(qiáng)度不同：顏色深淺不一。如果要做免疫組化找融享生物。

免疫熒光方法

是較好早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，先將已知抗體標(biāo)上熒光素，以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡便，所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。2）免疫酶標(biāo)方法

免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來的技術(shù)。基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是較好常用的技術(shù)。該方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是：定位準(zhǔn)確，對比度好，染色標(biāo)本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法，且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來越方便。在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測系統(tǒng)等。

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冰凍切片是借助低溫冷凍將活檢組織快速凍結(jié)達(dá)到一定的硬度進(jìn)行制片的一種方法，手術(shù)中等待冰凍快速病理報(bào)告，以病變性質(zhì)而決定手術(shù)方式和范圍。而及時(shí)、準(zhǔn)確的發(fā)出報(bào)告需要高質(zhì)量的冰凍切片，鑒于冰凍切片常出現(xiàn)染色模糊不清的現(xiàn)象，對病理判斷造成困難，甚至造成誤診或漏診，實(shí)踐中我們發(fā)現(xiàn)和組織固定、染色時(shí)返藍(lán)有一定關(guān)系，為了提高冰凍制片質(zhì)量，我們將FAA、Bouin氏液、88酒精三種固定液作了比較，并在染色中加用促藍(lán)液，認(rèn)為用88酒精固定液及染色時(shí)加用促藍(lán)液制作的冰凍切片質(zhì)量較理想，江蘇免疫學(xué)免疫組化機(jī)構(gòu)哪家好