這些常用免疫組織化學方法的原理如下：

1. 免疫熒光細胞化學技術

將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.

2. 免疫酶細胞化學技術

是免疫組織化學研究中較好常用的技術．基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞或組織內的相應抗原進行定位或定性研究．

3. 免疫膠體金技術

就是用膠體金標記一抗，二抗或其他的能特異性的結合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白）等作為探針對組織或細胞內的抗原進行定性，定位或定量研究．由于膠體金的電子密度高，多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究

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標本

實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類，前者包括石蠟切片（病理切片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。

其中石蠟切片是制作組織標本比較好常用、比較好基本的方法，對于組織形態保存好，且能作連續切片，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧性研究；石蠟切片制作過程對組織內抗原暴露有一定的影響，但可進行抗原修復，是免疫組化中優先的組織標本制作方法。抗體

免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體，單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體，應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。

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固定若想得到理想的ICC染色結果、正確地判斷抗原物質在組織細胞內的位置，除需有良好酶和抗體外，保持組織細胞內抗原物質的不動性（Immobility）和免疫活性也是至關重要的。換言之，如果抗原物質在組織細胞間彌散、丟失或失去免疫活性，無論如何努力染色都是徒勞的，所以說固定是ICC染色中非常重要的一環。ICC與其它組織學技術不同，除要求保存良好的結構外，還需保存組織抗原的免疫活性。一般認為，新鮮組織能夠比較大限度地保存組織抗原的免疫活性，但結構較差，易出現抗原彌散丟失現象。Cumming（1980）報告，不固定的組織切片ICC染色時，環鳥苷酸含量丟失80%以上

織材料的處理

  組織材料的處理是獲得良好免疫組織化學結果的前提，必需保證要檢測的細胞或組織取材新鮮，固定及時，形態保存完好，抗原物質的抗原性不丟失、不擴散和被破壞（下節 詳述）。

  三、免疫染色

  可在細胞涂片或組織切片上進行免疫染色。一般程序是：①標記抗體與標本中抗原反應結合；②用PBS洗去未結合的成分；③直接觀察結果（免疫熒光直接法）；或顯色后再用顯微鏡觀察（免疫酶直接法）。在此基礎上發展出間接法，多層法，雙標記法等各種方法，將在本書各有關章 節 內詳述。

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 免疫組織化學（Immunohistochemistry）又稱 免疫細胞化學。它是 組織化學的分支，它是用標記的 特異性抗體（或抗原）對組織內抗原（或抗體）的分布進行組織和細胞原位檢測技術。 中文名 免疫組化技術 外文名 Immunohistochemistry 又    稱 免疫細胞化學 屬    于 組織化學 目錄 1 前言 ? 發展介紹 ? 技術分類 ? 標記物 ? 應用 2 免疫組織化學 免疫組化技術前言 編輯 免疫組化技術發展介紹 ——1941年 Coons 首先用 熒光素 標記抗體—檢測肺組織內的肺炎雙球菌獲得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶標抗體技術——鐵蛋白標記Ab技術。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技術，建立 辣根過氧化物酶——抗體過氧化物酶（***）技術，使免疫細 胞化學得到廣泛應用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—銀染色法、半抗原標記法、 免疫電鏡 技術相繼問世。 承接各類病理實驗 免疫熒光,HE染色服務實驗、極速周期、經營豐富、高性價比、技術專業就找融享生物。吉林熒光免疫組化檢測哪里有

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拍照

有條件的話比較好立即拍照，若不能及時拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和濕度。使用熒光顯微鏡注意嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作，不要隨意改變程序;應在暗室中進行檢查;防止紫外線對眼睛的損害，在調整光源時應戴上防護眼鏡;檢查時間每次以1~2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發光強度逐漸下降，熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后，熒光也明顯減弱或褪色;激發光長時間的照射，會發生熒光的衰減和淬滅現象;所以較多不得超過2~3h;熒光顯微鏡光源壽命有限，標本應集中檢查，以節省時間，保護光源。天熱時，應加電扇散熱降溫，新換燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再啟用時，須待燈光充分冷卻后才能點燃。天中應避免數次點燃光源。關閉汞燈至少在開啟15-30分鐘后;標本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發;使用的玻片等載體，都必須厚度均勻，無明顯的自發熒光，如果使用油鏡，還必須保證鏡油為無熒光鏡油;電源比較好裝穩壓器，否則電壓不穩不只會降低汞燈的壽命，也會影響鏡檢的效果。

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