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來源: 發(fā)布時間:2021-08-04

酶消化法 常用的消化酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶,應嚴格掌握好消化時間、溫度和濃度。胰蛋白酶使用濃度為0.05%~0.1%,消化溫度為37℃,消化時間為10~40**要用于細胞內抗原的顯示:胃蛋白酶使用濃度為0.4%,消化溫度為37℃,消化時間為30~180要用于細胞間質抗原的顯示,如:Laminin(層粘蛋白),Collagen IV(IV型膠原蛋白)等。熱修復法 現(xiàn)常用微波修復、高溫高壓修復、水浴加熱修復法。較常用的修復法是pH6.0枸櫞酸緩沖液。修復過程中的注意要點是:(1)達到規(guī)定的溫度(92℃~95℃以上);(2)維持一定的時間,微波修復、水浴加熱須控制在10~15min,高溫高壓修復須控制在2min左右;(3)避免切片干涸,如果切片干涸,抗原則可能完全丟失;(4)加熱后必須經過室溫自然冷卻20~30min,使未折疊的蛋白分子鏈恢復天然構型。免疫組化服務優(yōu) 周期短,效率高。山西特殊染色免疫組化檢測哪里有

根據(jù)標記物的不同,免疫細胞化學技術可分為免疫熒光細胞化學技術,免疫酶細胞化學技術,免疫鐵蛋白技術,免疫金-銀細胞化學技術,親和免疫細胞化學技術,免疫電子顯微鏡技術等。近些年來,核酸分子原位雜交技術采用生物素、地高辛等非放射性物質標記探針,和免疫細胞化學技術密切結合,發(fā)展為雜交免疫細胞化學技術。不同的免疫細胞化學技術,各具有獨特的試劑和方法,但其基本技術方法是相似的,都包括抗休的制備,組織材料的處理、免疫染色、對照試驗、顯微鏡觀察等步驟。還有雙重和多重標記技術也有重要的用途。山西特殊染色免疫組化檢測哪里有免疫組化切片 不掉片,厚薄均勻哪里好找上海融享生物。

復染

目的是形成細胞輪廓,從而更好地對目標蛋白進行定位,經常用蘇木素復染(胞核染料)。注意蘇木素復染時間要看當時的室溫、溶液的新舊、目標抗原的定位等情況,一般數(shù)秒-數(shù)分鐘,胞漿蛋白可以適當時間長一點,而胞核算白則要短。不過這個如果染色不理想可以補救的。方法是:染色深則分化時間稍長些即可;染色淺則再置于蘇木素中染色即可。鹽酸酒精是分化,氨水是返蘭。作用不同。片子復染完后流水振洗,然后置于鹽酸酒精中數(shù)秒(一定動作要快)后拿出流水振洗,在放入氨水中返蘭即可。



它的原理

根據(jù)抗原抗體反應和化學顯色原理情況,組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應,前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結合,較終通過呈色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分,在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發(fā)生的抗原抗體反應產物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。




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免疫組織化學(Immunohisochemistry)檢測技術曾被公認為病理學發(fā)展史上的第二個里程碑,此項技術發(fā)展到現(xiàn)在,較好充實了病理學的內容,使病理診斷結果更精確,將病理學提高到了形態(tài)和功能相結合的水平。免疫組織化學方法的敏感性和特異性直接影響診斷結果的準確性。近兩年來,在本科同志的配合下,筆者已做免疫組化420例,取得了很好的效果,并且明顯的提高了診斷結果的準確性,支持了對臨床病人的診療。現(xiàn)提出以下五點供同道借鑒如果要做免疫組化找融享生物。山西特殊染色免疫組化檢測哪里有

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拍照

有條件的話比較好立即拍照,若不能及時拍照,也要封好片和用指甲油封固,保持避光和濕度。使用熒光顯微鏡注意嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序;應在暗室中進行檢查;防止紫外線對眼睛的損害,在調整光源時應戴上防護眼鏡;檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱或褪色;激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象;所以較多不得超過2~3h;熒光顯微鏡光源壽命有限,標本應集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再啟用時,須待燈光充分冷卻后才能點燃。天中應避免數(shù)次點燃光源。關閉汞燈至少在開啟15-30分鐘后;標本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā);使用的玻片等載體,都必須厚度均勻,無明顯的自發(fā)熒光,如果使用油鏡,還必須保證鏡油為無熒光鏡油;電源比較好裝穩(wěn)壓器,否則電壓不穩(wěn)不只會降低汞燈的壽命,也會影響鏡檢的效果。


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