液態(tài)流式技術(Luminex)特點: 多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標。 節(jié)省樣品:只需低至25μl的樣品體積。 高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。 應用范圍 應用領域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經、細胞間作用。 分析物類型:細胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標記物、基質金屬蛋白酶、基質金屬蛋白酶抑制劑。 其他應用:信號通路、重大疾病相關、Biomarker 開發(fā)、臨床應用。 LabEx多因子檢測作為高效的檢測手段,被廣泛應用在多種疾病研究中。CD138
細胞因子在腫塊物醫(yī)治中的作用 Il-2:增強NK細胞和CD8T細胞功能;增加血管通透性 IL-3:增強腫塊物抗原呈遞 IL-4:增強嗜酸性粒細胞功能和T細胞活化 IL-6:增強T細胞和B細胞功能;抑制IL-6可減少淋巴增生 IL-7:增強T細胞功能 IL-10:抑制腫塊物抗原呈遞 IL-12:增強Th1免疫和細胞毒性;抑制血管生成 IL-13:抑制對病毒性腫塊物的細胞毒性 IL-15:增強細胞毒性 IL-18:增強Th1免疫和細胞毒性;抑制血管生成 M-CSF:增強巨噬細胞功能 GM-CSF:增強腫塊物抗原呈遞 IFN-α:增強腫塊物抗原呈遞和細胞毒性 IFN-γ:增強腫塊物抗原呈遞和細胞毒性 TNF-α:誘導腫塊物細胞凋亡 TRAIL:誘導腫塊物細胞凋亡 FLT3ligand:刺激樹突狀細胞和NK細胞功能 Lymphotactin:增強T細胞募集 TGF-β:抑制T細胞效應器功能cxc趨化因子LabEx抗體芯片主要用于蛋白表達譜、蛋白質磷酸化及蛋白質相互作用等檢測。
液態(tài)流式技術(Luminex) 流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發(fā)展起來的多指標聯(lián)合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為中心,集流式 原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,可一管同時準確定量檢測2-100種不同的生物分子; 具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體、配體識別分析等多方面、多領域的研究。 基本原理: 應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分100種不同的微球。每種微球可以用 來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達100個蛋白或基因。 Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對 不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多 目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)優(yōu)勢: 靈敏度高 該測定法的靈敏度來自作為報告基團的酶。眾所周知,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。 特異性強 其特異性來自抗體或抗原的選擇性??乖贵w的結合實質上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由千兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系,所以抗原抗體反應具有高度的特異性。?LabEx 因子檢測技術有Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD等。
流式多因子檢測技術(CBA) 微球免疫分析系統(tǒng)CBA (Cytometric Bead Array)是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單 個樣品中的多個指標進行檢測。 CBA是種結合流式細胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應用技術,可以輕 松的在短時間內,同時檢測多種蛋白,其作用原理利用熒光強度不同的微 球,上面帶有可以辨認特定蛋白的抗體(capture antibody ),與樣本(例 如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細胞裂解液等)及PE檢測抗體(detection antibody)作用后,以流式細胞儀進行分析,根據PE熒光強度的不同用 FCAP Array軟件進行分析和標準品做比對后,可進行樣本內特定,蛋白的 定性或定量。 CBA具有以下優(yōu)點: 每次檢測需25-50ul 樣本;靈敏度可達 0.274pg/ml 時間t夬速,需 3-4小時,快速上樣 可同時測定30種 蛋白,實驗可重復性高 利用FCAP Array軟件, 不論樣本數目多少,可 快速分析完成分析 CBA,細胞因子微球檢測技術,是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法。Reg3A
LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長因子等高通量高靈敏檢測。CD138
酶聯(lián)免疫斑點技術(Elispot)技術優(yōu)勢 (1) 單細胞水平,活細胞功能檢測:彌補了體液中CK半衰期短的不足,當體液中某CK含量較低時,用ELISPOT 法檢測具有較高靈敏性。 (2) 操作簡便經濟,可以進行高通量篩選:既可檢測自發(fā)分泌細胞,又可檢測抗原特異性CK分泌細胞,具有較高特異性,并可觀察藥物治療反應,且使對CSF中T、B細胞研究成為可能,對神經免疫疾病發(fā)病機制研究及臨床療效觀察均有重要價值。 (3)靈敏度高:在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。靈敏度比傳統(tǒng)ELISA方法高2-3個數量級。CD138
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