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接觸生物標志物

來源: 發布時間:2022-04-22

多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramide signal amplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。 然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。 MSD平臺由于其獨特的電化學發光原理,可將許多非特異信號予以排除,對于各類生物學樣本的兼容度高。接觸生物標志物

基于luminex平臺的xMAP技術: Luminex :應用熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。 原理: 應用微球和流式細胞儀的原理, 微球內部含有三種免疫熒光, 通過熒光不同的比例可以區分 500 種不同的微球。 每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。 因此, 利用微球技術, 可以同時檢測高達 500 個蛋白或基因。 特點: 1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸 2、既能用于臨床,又能用于多學科科研領域 3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標 4、在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平 IL-15 elisa kit檢測服務Luminex既能檢測蛋白,又能檢測核酸。

酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。 基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。 測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。?其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀) 加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。?

單細胞功能組學(IsoPlexis)技術優勢 >在看似同質的細胞亞群內研究異質性 >利用功能蛋白質數據層和免疫細胞比較免疫應答情況 >通過多功能強度指數(PSI)建立參考點 >優化試驗以預測區分應答者和非應答者 >表征導致身體狀況 / 應答的生物學和功能驅動因素 技術原理 采用微流控技術,通過 12,000 個亞納升級別的微室同時捕獲上千個單細胞。搭配IsoCode 芯片抗體條形碼技術,捕獲每個小室中單個活細胞分泌的多重蛋白質,或者對單細胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進行捕獲,然后通過基于 ELISA 原理的全自動化蛋白檢測技術,捕獲多重蛋白的熒光信號,一次可采集多達 30 種以上的功能蛋白質。在檢測中從每個單細胞獲得的蛋白質組信號將無縫傳輸到 IsoSpeak 生信分析軟件,進行全自動分析和可視化呈現,并可直接用于文章發表。LabEx提供MSD超敏電化學發光平臺服務!

LUMINEX常見問題及解答(二) 6) 客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測? Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發Luminex試劑盒的經驗。但是,需要一系列的開發工作才能保證結果的特異性、重復性和可靠性。 7) 除了蛋白,LUMINEX技術是否還可以用于其它指標的檢測? 可以用于基因表達,基因多態性和HLA配型分析。 8) 如何判定 LUMINEX數據表達水平差異有無意義? 表達差異主要取決于標本的性質和數量,我們公司為客戶提供專業的數據統計服務。 9) LUMINEX實驗和流式細胞儀的優劣比較? Luminex技術是流式細胞儀和微球相結合的蛋白、核酸檢測技術, 檢測對象是蛋白質、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數目大,是一種高通量檢測技術。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。 由此可見,兩種方法應用方向有很大差別。 細胞因子檢測是一個強大的工具,通過定制識別產生積極反應的細胞因子的獨特組合。msd多因子檢測儀

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