腫塊物(瘤類)發病機制中的細胞因子(內源性及相關功能): Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的 IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需 IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用 IL-15(白介素15):促進自然殺傷 T 細胞白血病 IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1 和 Rag2 抑制腫塊物 M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲 GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物 TNF-α:化學誘發的皮膚腫塊物所需 MIF:抑制 p53 腫塊物抑制功能 TGF-β:抑制結腸腫塊物 Fas-Fas ligand:抑制淋巴瘤發生LabEx提供 MSD---電化學發光技術。Fibroblast Activation Protein alpha
流式多因子檢測技術(CBA) 微球免疫分析系統CBA (Cytometric Bead Array)是一個基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單 個樣品中的多個指標進行檢測。 CBA是種結合流式細胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應用技術,可以輕 松的在短時間內,同時檢測多種蛋白,其作用原理利用熒光強度不同的微 球,上面帶有可以辨認特定蛋白的抗體(capture antibody ),與樣本(例 如血清、血漿、培養上清液、細胞裂解液等)及PE檢測抗體(detection antibody)作用后,以流式細胞儀進行分析,根據PE熒光強度的不同用 FCAP Array軟件進行分析和標準品做比對后,可進行樣本內特定,蛋白的 定性或定量。 CBA具有以下優點: 每次檢測需25-50ul 樣本;靈敏度可達 0.274pg/ml 時間t夬速,需 3-4小時,快速上樣 可同時測定30種 蛋白,實驗可重復性高 利用FCAP Array軟件, 不論樣本數目多少,可 快速分析完成分析 TNFRSF18LabEx提供多音字檢測服務!
多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramide signal amplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。 然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。
多重熒光免疫組化技術優勢 1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔心抗體交叉反應,以及一抗二抗種屬匹配問題,減少了實驗設計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。 2.TSA技術可以用于檢測用傳統方法無法檢出的低豐度靶標?;诶阴0返男盘柗糯蠹夹g能夠提供極強的敏感度、檢測極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量,節約抗體,實測確實可以提升抗體的稀釋比例。 3. 熒光法多重免疫組化,可同時進行五個顏色通道以上,這種情況下發射光譜會重疊,我們可以借助多光譜成像系統來解決這個問題。這是傳統間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實反映關鍵蛋白的表達情況和相互之間的關系,從而極大地節約珍貴的樣品。 細胞因子的檢測常常被用作各項疾病中預測免疫反應強度的生物標志物。
抗體蛋白質芯片技術(Sengenics)優勢 1、包被蛋白具有正確折疊的空間結構/芯片表面水凝膠保護 2、特異性 蛋白質陣列上正確折疊的蛋白質可確保構象表位,可用于自身抗體結合(90% 的抗體表位是非線性的)。與顯示低信噪比的其他陣列相比,這會帶來特定的命中和低背景噪音。 3、檢測限<10pg/ml 蛋白質陣列可用于以極高的靈敏度檢測自身抗體,只需要 1 - 10 μL 血清。檢測限在10 pg/ml 范圍內,線性動態范圍至少為 5個數量級。 4、高重復性 Sengenics 蛋白質陣列使用多個陽性和陰性對照來測量研究和批次內和之間的重復性。下圖顯示在比較兩個不同批次中的 6524 個蛋白質數據點的自身抗體水平時,0.97以上的近乎完美 的 Pearson 相關性。 5、一致性高 Sengenics KREXTM 蛋白質折疊技術用于創建具有一致性的蛋白質陣列。下圖顯示了 Immunome 蛋白質陣列的蛋白質內復制變異系數(CV%) 百分比。Immunome的平均 CV% 為 7.2%。LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技術服務!TRAIL
LabEx 流式平臺:BD C6,BD celesta,BD calibur,12色流式檢測分析。Fibroblast Activation Protein alpha
液態流式技術(Luminex)特點: 多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標。 節省樣品:只需低至25μl的樣品體積。 高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。 應用范圍 應用領域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經、細胞間作用。 分析物類型:細胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標記物、基質金屬蛋白酶、基質金屬蛋白酶抑制劑。 其他應用:信號通路、重大疾病相關、Biomarker 開發、臨床應用。 Fibroblast Activation Protein alpha
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