酶聯免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。LabEx提供多音字檢測服務!細胞分選流式檢測服務
液態流式技術(Luminex)特點:多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標。節省樣品:只需低至25μl的樣品體積。高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。應用范圍應用領域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經、細胞間作用。分析物類型:細胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標記物、基質金屬蛋白酶、基質金屬蛋白酶抑制劑。其他應用:信號通路、重大疾病相關、Biomarker開發、臨床應用。sonic hedgehog信號通路檢測服務LabEx現有MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式及ELISA等實驗室技術平臺。
Q:樣本處理方案?A:血清:不含抗凝劑的**管**,室溫靜置2小時(避免震動,防止溶血),離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存血漿:含抗凝劑(EDTA、肝素,具體采取哪種抗凝劑,參考說明書)的**管**,,離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存細胞裂解液:收集細胞,PBS清洗后,離心10min(1000g,4℃),棄去上清,加入適量裂解液(107細胞對應200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存組織裂解液:適量RIPA裂解液加入組織中(10mg對應100-200ul裂解液),組織破碎器處理組織至勻漿(冰上處理),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存細胞上清:離心,取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存
液態流式技術(Luminex)流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為中心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,可一管同時準確定量檢測2-100種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體、配體識別分析等多方面、多領域的研究。基本原理:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分100種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達100個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。LabEx提供液態流式技術(Luminex)服務!
蛋白分析實驗技術1、MSD超敏電化學發光平臺針對550位北美和歐洲的生物醫藥研究人員的報告中顯示,基于電化學發光技術的MSD(MesoScaleDiscovery)是較受歡迎的5大免疫分析品牌之一。可將WesternBlot從16小時縮短至4.5小時。基本原理:電化學發光是一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應,是電化學和化學發光兩個過程的完美結合。MSD電化學發光檢測技術使用SULFO-TAGTM標記物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的電極表面通電后,電化學作用激發SULFO-TAGTM標記物發出強光。多因子實驗的正式實驗,可以分批次檢測。信號通路檢測服務
為啥高分的文章用的都在做細胞因子的檢測?細胞分選流式檢測服務
多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。細胞分選流式檢測服務
上海樂備實生物技術有限公司是一家從事生物科技、生物制品、醫藥科技領域的技術開發、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,檢驗技術的研發,從事貨物及技術的進出口業務,化工產品及原料(除危險化學品、監控化學品、易制毒化學品)、實驗室耗材與設備的銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】的公司,是一家集研發、設計、生產和銷售為一體的專業化公司。樂備實生物作為從事生物科技、生物制品、醫藥科技領域的技術開發、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,檢驗技術的研發,從事貨物及技術的進出口業務,化工產品及原料(除危險化學品、監控化學品、易制毒化學品)、實驗室耗材與設備的銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】的企業之一,為客戶提供良好的標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務。樂備實生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。樂備實生物始終關注醫藥健康行業。滿足市場需求,提高產品價值,是我們前行的力量。