酶聯免疫斑點技術(Elispot)特點:酶聯免疫斑點技術Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設計在96孔培養板上進行,直接以培養板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質,包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養板的孔內加入細胞培養基(現在無血清ELISPOT技術已經成熟,培養基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養。多因子技術服務我們LabEx是專業!炎性因子
抗體芯片技術服務包括:1,樣品蛋白質抽提:a.實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實驗對象為血清,則直接進入步驟3。2,蛋白質定量:按蛋白質定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。3.細胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(若標本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。b.加入標記好的抗體室溫孵育1小時。4,抗體芯片檢測5.提供實驗報告:包括詳細的實驗方法和芯片實驗結果的各種圖表和數據比較。您只需提供保存完好的標本(血清、組織或細胞、細胞上清或其他非常規液質生物樣本),本公司專業的技術服務人員就可替您完成實驗操作與數據分析。PAI-1LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長因子等高通量高靈敏檢測。
問:因子檢測技術有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數量,建議是4的倍數,否則會造成浪費。
Luminex:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達500個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以**減少生物樣品的消耗量,節省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。目前,Luminex試劑盒已經可以檢測500多種蛋白質分子,包括細胞因子、***、自身抗體、**標志物等。細胞因子檢測是一個強大的工具,通過定制識別產生積極反應的細胞因子的獨特組合。
免疫組化技術是用標記物標記的抗體與組織或細胞的抗原(如蛋白質、多肽、酶、***、病原體以及受體等)反應,結合形態學檢查,對抗原作定性、定量、定位檢測的技術。目前通常選用免疫酶組化間接染色法進行實驗,利用該技術可進行細胞、亞細胞水平的檢測。 **近幾年,分子生物學研究異常活躍,但**終還要歸到形態上來。用免疫組織化學方法對所研究的大分子進行定位,進而深入研究其功能。 分類:免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等 特點:具有特異性強、靈敏度高及能將形態研究與功能、代謝研究有機地結合在一起 實驗標本:實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。 抗體:免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術。趨化因子家族
多因子技術可同時檢測多個樣本的多個指標,如通路中多個相關蛋白的共檢測。炎性因子
1)LUMINEX應用于哪些領域?生物醫學研究,生物標記物開發,臨床檢測等領域。Luminex技術主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息?檢測蛋白和基因的數目主要取決于試劑盒。蛋白質檢測目前比較高可以達到50個左右,基因檢測比較高達500個。5)如何保證檢測結果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產品經過了嚴格的質量控制。同時,我們檢測公司也有近15年的經驗、嚴格的操作程序和質量控制體系。6)客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測?Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發Luminex試劑盒的經驗。但是,需要一系列的開發工作才能保證結果的特異性、重復性和可靠性。炎性因子
上海樂備實生物技術有限公司坐落在古丹路15號18號樓4樓,是一家專業的從事生物科技、生物制品、醫藥科技領域的技術開發、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,檢驗技術的研發,從事貨物及技術的進出口業務,化工產品及原料(除危險化學品、監控化學品、易制毒化學品)、實驗室耗材與設備的銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】公司。公司目前擁有較多的高技術人才,以不斷增強企業重點競爭力,加快企業技術創新,實現穩健生產經營。上海樂備實生物技術有限公司主營業務涵蓋標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務,堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。公司深耕標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領域拓展。