多重?zé)晒饷庖呓M化，主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification)，是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理，前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉，共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束，熒光素都結(jié)合好后，然后去檢測結(jié)果。LabEx多因子檢測技術(shù)應(yīng)用。luminex多細胞因子檢測

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；4)、非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果；5)、DAB孵育時間過長或濃度過高；6)、PBS沖洗不充分，殘留抗體結(jié)果增強著色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要；7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片，這容易增強非特異性著色。luminex液相芯片激光液態(tài)流式技術(shù)(Luminex)，流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等。

多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)優(yōu)勢1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育，因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng)，以及一抗二抗種屬匹配問題，減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。2.TSA技術(shù)可以用于檢測用傳統(tǒng)方法無法檢出的低豐度靶標。基于酪酰胺的信號放大技術(shù)能夠提供極強的敏感度、檢測極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量，節(jié)約抗體，實測確實可以提升抗體的稀釋比例。3.熒光法多重免疫組化，可同時進行五個顏色通道以上，這種情況下發(fā)射光譜會重疊，我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來解決這個問題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實反映關(guān)鍵蛋白的表達情況和相互之間的關(guān)系，從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。

蛋白芯片能應(yīng)用于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，血管再生，細胞凋亡，腫塊物，肥胖，以及干細胞，藥物篩選等的研究。在用蛋白芯片進行篩選之后，你還可以用R&DSystems可靠的QuantikineELISA試劑盒來量化你的結(jié)果，而更多的抗體將為深入研究提供更豐富的資源?多樣性：一張膜可檢測15-119個目標蛋白；?高效率：所需樣品量少，縮短操作時間，有效節(jié)約成本；?操作簡單：即用型產(chǎn)品，無需購買抗體，無需特殊儀器?品質(zhì)：高特異性和低批間差距保證樣品的檢測結(jié)果的穩(wěn)定性；LabEx提供抗體芯片技術(shù)服務(wù)，您只需提供保存完好的標本（組織、細胞培養(yǎng)上清、血清、血漿），本公司的芯片技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成實驗操作與數(shù)據(jù)分析，向您提供由您所選的任何一種芯片的實驗結(jié)果，可以為您節(jié)省大量的時間與精力。LabEx年多因子檢測樣本量達20w+！

液相懸浮芯片技術(shù)產(chǎn)品多因子技術(shù)可同時檢測多個樣本的多個指標，如通路中多個相關(guān)蛋白的共檢測。雖然液相蛋白定量檢測的技術(shù)很多，但是大多數(shù)的技術(shù)能對樣本進行單一指標的檢測，同時檢測多個指標時則需要提供大量的樣本分批檢測，操作繁瑣，且各指標間差異性較大。對于樣本量較少或需要對比各指標的用戶，傳統(tǒng)的技術(shù)無法滿足需要。日常實驗中，常需對溶液體系中的可溶性蛋白進行定量檢測，如細胞培養(yǎng)上清或血清中的細胞因子含量的定量分析，由于這些因子的含量較少，低于一般常規(guī)方法的檢測下限，使用常規(guī)的蛋白檢測方法如WesternBlot等很難檢測。而多因子技術(shù)樣本需求量少（25~60μL/孔），檢測指標多，可兼容血清/血漿，細胞上清，細胞/組織裂解液，腦脊液等多種生物學(xué)體液。其靈敏度高（部分panel可達到亞fg/ml），寬線性范圍（達到6個log），具有高重復(fù)性（板內(nèi)CV<6-8%，板間<10%，批間<15%），適宜多類型指標的同時測定（炎癥，趨化，代謝……）。LabEx提供28種抗體芯片，用于人，小鼠和大鼠物種的蛋白檢測。血清中細胞因子用流式檢測

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LUMINEX常見問題及解答（一）1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究，生物標記物開發(fā)，臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何？靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對于同樣的抗體對，Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的？血清、血漿是常用的樣本，每次檢測需要10ul，每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測，制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息？檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測目前可以達到50個左右，基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結(jié)果的特異性？檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司，產(chǎn)品經(jīng)過了嚴格的質(zhì)量控制。同時，我們檢測公司也有近15年的經(jīng)驗、嚴格的操作程序和質(zhì)量控制體系。luminex多細胞因子檢測

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