免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實驗服務,提供樣本細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費用另計)。液態流式技術(Luminex),流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等。ARY019檢測服務
基于luminex平臺的xMAP技術:Luminex:應用熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。原理:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達500個蛋白或基因。特點:1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸2、既能用于臨床,又能用于多學科科研領域3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標4、在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平flowjo軟件分析rosLabEx提供MSD超敏電化學發光平臺服務!
多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。
Q:多因子實驗還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實驗中血清好檢測,還是血漿好檢測?A:文獻報道EDTA的血漿適合做多因子實驗,具體需研究者根據自己實際條件選擇。Q:為什么要做預實驗?A:試劑說明書中的樣本稀釋比例不精確,需要進一步確認。預實驗主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測范圍內,從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過高,導致結果不準確。3.讓研究者在正式實驗中有選擇的依據。Q:血清血聚溶血,對實驗結果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細胞破裂導致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴重程度看區別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻上看沒有明確的數據支持。LabEx提供高通量蛋白組學(Olink)服務!
Q:ELISA實驗預實驗的目的?A:確認一下樣本的稀釋比例,雖然試劑盒給出了一些建議,但是不同客戶的樣本處理方式不同,可能會出現高出標準曲線的情況,那就要預實驗測試看下B、降低客戶的預期,如果預實驗反饋出,客戶的結果在檢測下限附近,可以讓客戶更換樣本,節省試劑盒Q:ELISA實驗預實驗是如何安排的?A:會做整條標準曲線,比較好由客戶自己挑選的有代表性的預實驗樣本,至少2個(高值與低值各一,各4個稀釋梯度),**少耗費16個孔;若客戶吝惜試劑,可只做標準曲線的兩個點(比較高點和背景點,確認預實驗樣本的濃度是否在背景點以上或者是附近),預實驗樣本做幾個稀釋度測試(至少2個樣本各3個稀釋度),**少耗費8個孔;為避免樣本反復凍融或正式實驗樣本不夠,預實驗樣本需要另外準備;為啥高分的文章用的都在做細胞因子的檢測?心臟生物標志物
流式細胞術(flow cytometry,FCM)是一項新型的、發展迅速的生物醫學分析技術。ARY019檢測服務
LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術平臺,用心服務,現有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業的實驗室技術平臺,助推科研進步!多因子檢測技術包括Luminex、MSD、CBA、AntibodyArray,一份樣本可檢測幾十種不同的生物分子,可實現高通量、高靈敏度等特點免疫組化可通過HE、IF、Tunel、DAB、Nissl、Masson染色等,對指標進行定位分析,并且可提供病理分析平臺。流式細胞術通過不同熒光對同一細胞進行對參數分析,可提供細胞的12色染色。檢測速度快,分析樣本量大,包含的樣本種類多。ARY019檢測服務
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