LUMINEX常見問題及解答(二)6)客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測?Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發Luminex試劑盒的經驗。但是,需要一系列的開發工作才能保證結果的特異性、重復性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技術是否還可以用于其它指標的檢測?可以用于基因表達,基因多態性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX數據表達水平差異有無意義?表達差異主要取決于標本的性質和數量,我們公司為客戶提供專業的數據統計服務。9)LUMINEX實驗和流式細胞儀的優劣比較?Luminex技術是流式細胞儀和微球相結合的蛋白、核酸檢測技術,檢測對象是蛋白質、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數目大,是一種高通量檢測技術。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應用方向有很大差別。為啥高分的文章用的都在做細胞因子的檢測?cathepsin s elisa檢測服務
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實驗服務,提供樣本細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費用另計)。mrna的生物學功能檢測服務LabEx年多因子檢測樣本量達20w+!
產生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。
MSD經典10因子推薦:中檢院《CAR-T細胞醫治產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到,使用MSD技術檢測CAR-T細胞醫治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術-電化學發光和點陣技術MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學發光免疫分析)技術是基于ELISA基本原理的升級,在板底通電從而激發標記物SULFO-TAG發光并由CCDCamera進行信號采集;MSDECL技術提高免疫分析的靈敏度,延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術,在96孔石墨電極板里可實現10個指標每孔的檢測,同時實現多個指標定量。MSD技術獨具一格的“六合一”特點:亞fg/ml靈敏度,低背景,多靶點檢測,6個數量級線性范圍,適用于不同樣本基質(血清/血漿,細胞培養上清,腦脊液,尿液,組織勻漿,細胞裂解液)(人/猴子/小鼠/大鼠),5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠:炎癥反應、免疫調節、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供;檢測我們來做,助您的時間更有價值!LabEx抗體芯片主要用于蛋白表達譜、蛋白質磷酸化及蛋白質相互作用等檢測。
找到信號通路的關鍵節點是復雜且耗時耗力的,抗體芯片試劑盒可以在一個實驗室里監測信號通路中眾多關鍵信號組分的變化,為您節省寶貴的時間和試劑!每個試劑盒有2張玻片,每張玻片上有8或16張墊片,可同時檢測達32個樣本,這樣可使研究者在一次實驗里有充分的自由度來檢測多種濃度,細胞系或時間節點的樣本!抗體芯片基于夾心法ELISA原理進行設計,將眾多信號通路關鍵節點蛋白的捕獲抗體布于樣品孔內做成抗體點陣,隨后加入相應的識別抗體混合物,再利用兩種不同的顯色方式呈現結果,即化學發光法和熒光法檢測!LabEx提供28種抗體芯片,用于人,小鼠和大鼠物種的蛋白檢測。MSD多因子檢測平臺
LabEx提供高通量蛋白組學(Olink)服務!cathepsin s elisa檢測服務
酶聯免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。cathepsin s elisa檢測服務
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