腫塊物(瘤類)發病機制中的細胞因子(內源性及相關功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進自然殺傷T細胞白血病IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學誘發的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發生LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等經典信號通路研究。msd生物化學發光實驗
MSD經典10因子推薦:中檢院《CAR-T細胞醫治產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到,使用MSD技術檢測CAR-T細胞醫治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術-電化學發光和點陣技術MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學發光免疫分析)技術是基于ELISA基本原理的升級,在板底通電從而激發標記物SULFO-TAG發光并由CCDCamera進行信號采集;MSDECL技術提高免疫分析的靈敏度,延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術,在96孔石墨電極板里可實現10個指標每孔的檢測,同時實現多個指標定量。MSD技術獨具一格的“六合一”特點:亞fg/ml靈敏度,低背景,多靶點檢測,6個數量級線性范圍,適用于不同樣本基質(血清/血漿,細胞培養上清,腦脊液,尿液,組織勻漿,細胞裂解液)(人/猴子/小鼠/大鼠),5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠:炎癥反應、免疫調節、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供;檢測我們來做,助您的時間更有價值!msd電化學發光的應用LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術。
Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯到不同熒光標記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時,一束激光照射磁珠上的熒光,識別磁珠標記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測哪種細胞因子,從而實現“定性”作用。進一步,通過加入生物素標記的高親和配對檢測抗體,同步識別磁珠抓取的目標細胞因子,形成“三明治”結構,并加入SA-PE偶聯上生物素,通過另一束激光照射進行信號放大檢測,實現“定量”作用。
Q:樣本處理方案?A:血清:不含抗凝劑的**管**,室溫靜置2小時(避免震動,防止溶血),離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存血漿:含抗凝劑(EDTA、肝素,具體采取哪種抗凝劑,參考說明書)的**管**,,離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存細胞裂解液:收集細胞,PBS清洗后,離心10min(1000g,4℃),棄去上清,加入適量裂解液(107細胞對應200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存組織裂解液:適量RIPA裂解液加入組織中(10mg對應100-200ul裂解液),組織破碎器處理組織至勻漿(冰上處理),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存細胞上清:離心,取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存電化學發光,一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應,是電化學和化學發光兩個過程的完美結合。
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實驗服務,提供樣本細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費用另計)。LabEx流式染色服務:現可進行流式celesta 12色染色,細胞培養加染色一條龍。luminex檢測細胞因子
LabEx多因子檢測作為高效的檢測手段,被廣泛應用在多種疾病研究中。msd生物化學發光實驗
酶聯免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。msd生物化學發光實驗
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