Q:樣本處理方案?A:血清:不含抗凝劑的**管**,室溫靜置2小時(避免震動,防止溶血),離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存血漿:含抗凝劑(EDTA、肝素,具體采取哪種抗凝劑,參考說明書)的**管**,,離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存細胞裂解液:收集細胞,PBS清洗后,離心10min(1000g,4℃),棄去上清,加入適量裂解液(107細胞對應200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存組織裂解液:適量RIPA裂解液加入組織中(10mg對應100-200ul裂解液),組織破碎器處理組織至勻漿(冰上處理),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存細胞上清:離心,取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存多因子技術服務我們LabEx是專業!Eotaxin檢測服務
抗體蛋白質芯片技術(Sengenics)優勢1、包被蛋白具有正確折疊的空間結構/芯片表面水凝膠保護2、特異性蛋白質陣列上正確折疊的蛋白質可確保構象表位,可用于自身抗體結合(90%的抗體表位是非線性的)。與顯示低信噪比的其他陣列相比,這會帶來特定的命中和低背景噪音。3、檢測限<10pg/ml蛋白質陣列可用于以極高的靈敏度檢測自身抗體,只需要1-10μL血清。檢測限在10pg/ml范圍內,線性動態范圍至少為5個數量級。4、高重復性Sengenics蛋白質陣列使用多個陽性和陰性對照來測量研究和批次內和之間的重復性。下圖顯示在比較兩個不同批次中的6524個蛋白質數據點的自身抗體水平時,0.97以上的近乎完美的Pearson相關性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白質折疊技術用于創建具有一致性的蛋白質陣列。下圖顯示了Immunome蛋白質陣列的蛋白質內復制變異系數(CV%)百分比。Immunome的平均CV%為7.2%。mrna反轉錄檢測服務LabEx 免疫組化服務:包括DAB染色、HE染色、Masson染色、免疫熒光(IF)。
產生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。
LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術經典炎癥十因子、高通量細胞因子初篩液相懸浮芯片:高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯到不同熒光標記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。進一步加入生物素標記的高親和配對二抗結合SA-PE進行信號放大,以實現對多種微量細胞因子的有效檢測。利用梯度稀釋的標準品檢測信號構建標準曲線,實現大量目標樣本中多因子的同時檢測和準確定量。特點1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸2、既能用于臨床,又能用于多學科科研領域3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標4、在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平LabEx現有MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式及ELISA等實驗室技術平臺。
MSD經典10因子推薦:中檢院《CAR-T細胞醫治產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到,使用MSD技術檢測CAR-T細胞醫治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術-電化學發光和點陣技術MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學發光免疫分析)技術是基于ELISA基本原理的升級,在板底通電從而激發標記物SULFO-TAG發光并由CCDCamera進行信號采集;MSDECL技術提高免疫分析的靈敏度,延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術,在96孔石墨電極板里可實現10個指標每孔的檢測,同時實現多個指標定量。MSD技術獨具一格的“六合一”特點:亞fg/ml靈敏度,低背景,多靶點檢測,6個數量級線性范圍,適用于不同樣本基質(血清/血漿,細胞培養上清,腦脊液,尿液,組織勻漿,細胞裂解液)(人/猴子/小鼠/大鼠),5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠:炎癥反應、免疫調節、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供;檢測我們來做,助您的時間更有價值!樣本兼容度高:可兼容血清/血漿、細胞上清、細胞/組織裂解液、腦脊液等多種生物學體液。ARY012檢測服務
LabEx提供 MSD---電化學發光技術。Eotaxin檢測服務
液態流式技術(Luminex)流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為中心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,可一管同時準確定量檢測2-100種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體、配體識別分析等多方面、多領域的研究。基本原理:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分100種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達100個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。Eotaxin檢測服務
上海樂備實生物技術有限公司是一家集研發、制造、銷售為一體的****,公司位于古丹路15號18號樓4樓,成立于2018-04-28。公司秉承著技術研發、客戶優先的原則,為國內{主營產品或行業}的產品發展添磚加瓦。公司主要經營標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務等產品,產品質量可靠,均通過醫藥健康行業檢測,嚴格按照行業標準執行。目前產品已經應用與全國30多個省、市、自治區。LabEx為用戶提供真誠、貼心的售前、售后服務,產品價格實惠。公司秉承為社會做貢獻、為用戶做服務的經營理念,致力向社會和用戶提供滿意的產品和服務。上海樂備實生物技術有限公司以市場為導向,以創新為動力。不斷提升管理水平及標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務產品質量。本公司以良好的商品品質、誠信的經營理念期待您的到來!