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流式cba多因子檢測外包實驗

來源: 發(fā)布時間:2023-03-06

LabEx可提供的服務(wù)及優(yōu)勢(二)LabEx服務(wù)的優(yōu)勢:1、專業(yè)的抗體公司;2、先進的實驗儀器平臺;3、可靠、放心的結(jié)果;4、實惠、親民的價格;5、認真、嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。Luminex平臺服務(wù):應(yīng)用微球和流式細胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種熒光免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此利用微球技術(shù),可以同時檢測高達500個蛋白或基因。MSD(MesoScaleDiscovery):將WesternBlot從16小時縮短至4.5小時。針對550位北美和歐洲的生物醫(yī)藥研究人員的報告中顯示,基于電化學發(fā)光技術(shù)的MSD(MesoScaleDiscovery)是較受歡迎的5大免疫分析品牌之一。CBA(CytometricBeadsArray):即細胞因子微球檢測技術(shù)。是一種基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。LabEx提供蛋白水平檢測服務(wù)!流式cba多因子檢測外包實驗

抗體芯片技術(shù)服務(wù)包括:1.樣品蛋白質(zhì)抽提:a.實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實驗對象為血清,則直接進入步驟3。2.蛋白質(zhì)定量:按蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。3.細胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(zhì)(若標本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。b.加入標記好的抗體室溫孵育1小時。4.抗體芯片檢測5.提供實驗報告:包括詳細的實驗方法和芯片實驗結(jié)果的各種圖表和數(shù)據(jù)比較。您只需提供保存完好的標本(血清、組織或細胞、細胞上清或其他非常規(guī)液質(zhì)生物樣本),本公司專業(yè)的技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成實驗操作與數(shù)據(jù)分析。OlinkLabEx 樣本制備平臺:以P2細胞房,磁珠分選,gentleMACS,為下游實驗提供樣本。

細胞因子在腫塊物醫(yī)治中的作用Il-2:增強NK細胞和CD8T細胞功能;增加血管通透性IL-3:增強腫塊物抗原呈遞IL-4:增強嗜酸性粒細胞功能和T細胞活化IL-6:增強T細胞和B細胞功能;抑制IL-6可減少淋巴增生IL-7:增強T細胞功能IL-10:抑制腫塊物抗原呈遞IL-12:增強Th1免疫和細胞毒性;抑制血管生成IL-13:抑制對病毒性腫塊物的細胞毒性IL-15:增強細胞毒性IL-18:增強Th1免疫和細胞毒性;抑制血管生成M-CSF:增強巨噬細胞功能GM-CSF:增強腫塊物抗原呈遞IFN-α:增強腫塊物抗原呈遞和細胞毒性IFN-γ:增強腫塊物抗原呈遞和細胞毒性TNF-α:誘導(dǎo)腫塊物細胞凋亡TRAIL:誘導(dǎo)腫塊物細胞凋亡FLT3ligand:刺激樹突狀細胞和NK細胞功能Lymphotactin:增強T細胞募集TGF-β:抑制T細胞效應(yīng)器功能

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率測定。

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酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)特點:酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設(shè)計在96孔培養(yǎng)板上進行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì),包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。流式cba多因子檢測外包實驗

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