人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分選陽性率;神經球計數法分析CD133+/-亞群細胞神經球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細胞表面神經干細胞(NSCs)標記物CD133,神經巢蛋白(nestin)表達情況;檢測CD133+/-亞群細胞經誘導分化后細胞表面分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達情況.結果:CD133+亞群細胞具有干細胞特性,可形成明顯的神經球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標記物CD133,nestin表達陽性,經誘導分化后分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達陽性;CD133-亞群細胞無上述特性.結論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。上海蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商
免疫磁珠技術(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內外研究的一種新的免疫學技術.隨著納米技術的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細胞活性等優(yōu)點,因此它能從大量外周血細胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結合能力;選擇6種不同的偶聯緩沖溶液,設置了6個主要偶聯時間和6組偶聯溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯條件.結果:制備的多克隆抗體效價為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯2h,偶聯抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達77.0%.結論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測時間至少縮短20h.標記的腫瘤細胞江蘇蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠銷售利用人免疫球蛋白構建免疫磁珠富集金葡菌條件優(yōu)化。
微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經干細胞并進行培養(yǎng),為研究神經干細胞的特性與神經干細胞的培養(yǎng)和移植研究創(chuàng)造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經巢蛋白(nestin)陽性的細胞群,以流式細胞術檢測陽性細胞純度,以臺盼藍染色法檢測細胞活性.結果分離的神經干細胞流式細胞儀檢測細胞nestin陽性表達率為(88.5±3.6)%,細胞存活率為(96.3±1.8)%.結論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經干細胞群落簡便,有效,可以為神經干細胞的細胞培養(yǎng)和移植提供細胞來源.
免疫磁珠分離羊水來源OCT-4陽性胎兒干細胞的可行性.方法 采用免疫磁珠細胞分選法去除羊水細胞中CD44和SSEA4陽性細胞,使OCT-4陽性胎兒干細胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴增后,觀察細胞生長特性,免疫熒光染色計算OCT-4陽性胎兒干細胞得率,Real-TimePCR比較分離前后OCT-4表達量的差異,免疫組化檢測NANOG,AKP,MAP-2,NGFR和Myosin等細胞因子的表達.結果 經免疫磁珠分離的細胞接種12h內貼壁生長,形態(tài)呈梭形,部分呈多角形,融合后形成輻射狀排列.免疫熒光染色OCT-4陽性細胞得率為(90.15±8.25)%,Real-TimePCR檢測結果顯示分離后細胞OCT-4的表達量較未分離細胞和MSC有***性差異(P<0.01).原代培養(yǎng)可獲得(1～2)×107個細胞,3代可獲得(2～4)×108個細胞,傳至10代以后細胞的增殖能力下降.免疫組化結果顯示OCT-4陽性胎兒干細胞表達NANOG,AKP,MAP-2和NGFR等細胞因子.結論 免疫磁珠細胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽性的胎兒干細胞,分離后的細胞保持干細胞原有特性及生物學特征,可作為組織工程種子細胞.多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應用。
免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133^+細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細胞混雜生長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細胞提取中的應用。北京anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好
免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。上海蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商
免疫磁珠法(MiniMACS)在分離純化外周血CD4+和CD8+T淋巴細胞亞群中的應用.方法:應用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(Peripheralbloodmononucleatecells,PBMC),采用MiniMACS分別分離和純化39例標本外周血PBMC中的CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞,并經流式細胞儀分析細胞純度和臺盼藍染色的方法對細胞活力進行評估.結果:MiniMACS分離外周血CD4+T淋巴細胞前,后細胞純度分別為(37.38±5.74)%,(97.75±1.03)%(P〈0.001),CD8+T淋巴細胞分離純化前后細胞純度分別為(20.11±6.83)%,(96.85±1.86)%(P〈0.001);外周血分離前PBMC細胞活力為(97.66±2.73)%,純化為CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞后細胞活力分別為(97.44±3.08)%,(98.05±2.92)%(P〉0.05).結論:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞且不改變細胞的活力.上海蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商
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