人腦**組織中分離,培養,純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分選陽性率;神經球計數法分析CD133+/-亞群細胞神經球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細胞表面神經干細胞(NSCs)標記物CD133,神經巢蛋白(nestin)表達情況;檢測CD133+/-亞群細胞經誘導分化后細胞表面分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達情況.結果:CD133+亞群細胞具有干細胞特性,可形成明顯的神經球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標記物CD133,nestin表達陽性,經誘導分化后分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達陽性;CD133-亞群細胞無上述特性.結論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。河南anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
核酸提取磁珠通過對磁珠進行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實現對核酸的高通量、自動化提取,這一技術產生于20世紀80年代,已經有了成熟的試劑盒并形成為產業。隨著基因檢測、個性化給藥、產前診斷等的普及,在生物行業各領域都追求高通量、自動化的***,傳統DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優勢則愈來愈明顯:①能夠實現自動化、大批量操作,已有96孔的核酸自動提取儀,用一個樣品的提取時間即可實現對96個樣品的處理,符合生物學高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發時能夠進行快速及時的應對,這一特點使得傳統方法望塵莫及;②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內完成;③安全無毒,不使用傳統方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對實驗操作人員的傷害減少到**少,完全符合現代環保理念;④磁珠與核酸的特異性結合使得提取的核酸純度高、濃度大。陜西protein A/G COIP免疫磁珠性能多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應用。
磁珠與抗體偶聯的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養法結合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術對單增李斯特菌進行分離鑒定的檢測方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測提供一種快速,高效和靈敏的檢測新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質穩定的磁珠用以制備免疫磁珠;設計正交試驗,摸索pH,溫度,時間對氨基修飾磁珠與多抗偶聯的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設計不同的偶聯緩沖溶液,偶聯時間,偶聯溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯條件,運用制備的免疫磁珠對樣品中的單增李斯特菌進行捕獲,并與顯色平板結合試驗,鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.
常用的磁珠法DNA提取試劑盒,國外的有Dynal、Qiagen等,國內將磁珠應用于核酸提取的研究起源于02年左右,經過近些年的反復試驗,形成了穩定的核酸提取體系,并已被***用于一些疾病(如乙肝、丙肝、結核菌)等的定量檢測(如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒)。國產磁珠法試劑盒與進口產品相比,已不單單是只具有價格優勢,其產品的穩定性、高效性、提取出的核酸的質量與產量都足以與進口磁珠法試劑盒媲美。但是進口試劑盒長期以來形成的完善的銷售渠道對國產試劑盒的推廣是一大挑戰。利用BEENBIO免疫磁珠技術檢測大腸*細胞。
免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1^+陽性細胞,獲得同質性骨髓基質干細胞.方法:實驗于2004-06/2005-06在東南大學修復重建外科研究所實驗室完成.采集正常自愿獻髓者骨髓,淋巴細胞分離液體離心純化分離后利用免疫磁珠分離出STRO-1^+細胞,研究其生長曲線,體外擴增能力,集落形成能力,細胞表型,細胞周期,成骨能力.結果:①利用免疫磁珠可從成人骨髓中獲取STRO-1^+細胞.經體外培養發現STRO-1^+細胞貼壁生長,相差顯微鏡下STRO-1^+細胞呈成纖維細胞梭形外觀.②生長曲線可分為細胞生長延滯期,對數生長期及穩定期,細胞倍增時間為57h.③STRO-1^+細胞可以在體外擴增12周左右,形成的成纖維細胞集落數,處于細胞分裂期的細胞數,擴增倍數均低于傳統分離方法得到的骨髓基質干細胞.④經流式細胞儀檢測,STRO-1^+細胞穩定地表達CD29,CD44,CD105,不表達造血細胞系的表面標記CD14,CD34,CD45,HLA-DR.⑤經成骨培養發現STRO-1^+的骨髓基質干細胞具有很強的成骨分化能力.結論:利用免疫磁珠能夠從成人骨髓中快速分離,純化骨髓基質干細胞,且具有高效,靈敏。免疫磁珠分選兔前軟骨干細胞及細胞研究平臺的建立。廣東anti-HA COIP免疫磁珠哪家好
免疫磁珠法分離和純化胚胎神經干細胞。河南anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.河南anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
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