免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養人骨髓來源多能成體祖細胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細胞,在自制培養基下貼壁培養后,將獲取的骨髓貼壁細胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負分選,錐蟲藍拒染實驗計數MACS分選前后細胞活力.流式細胞儀鑒定分選后細胞純度;流式細胞儀分析培養細胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達情況.結果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細胞純度大于98%;流式細胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達細胞比率為99.2%,CD44陽性細胞比率為98.3%,CD34陽性細胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細胞比率為5.3%.結論:CD45,GlyA免疫微磁珠負分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養基中有較強的增殖能力.紅細胞膜免疫磁珠檢測成分血中抗A/抗B的研究。陜西COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133^+細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜生長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.湖北anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家應用免疫磁珠分離法純化弓形蟲速殖子的研究。

抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經50%硫酸銨粗提后,再經陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價偶聯于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結果進行比較。結果共獲得5株雜交瘤細胞株,其中1F12細胞株分泌的抗體效價、相對親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價為106,相對親和力為0.2mg/L,與FITC標記的BSA可特異性結合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結合熒光素標記的蛋白。應用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達0.1ng/ml。結論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應用于免疫檢測分析的價值。

免疫磁珠（Immunomagneticbead,IMB）技術是20世紀80年代出現的技術方法。以免疫學為基礎，滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化及分子遺傳學等各個領域，其在免疫檢測、細胞分離、生物大分子純化和分子生物學等方面有著越來越***的使用。免疫磁珠的結構：磁珠是由**金屬顆粒（Fe2O3,Fe3O4）,**外層包裹的高分子材料（如聚苯乙烯、聚氯乙烯）和**外層的功能配基（如-NH2，-COOH、-OH、-CHO）組成。免疫磁珠在生物醫學領域的應用：1.細胞分選，2.蛋白質/抗體分離與純化。3.核酸分離純化核酸結合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。4.免疫檢測免疫磁珠由于粒徑小，比表面積大，可捕獲較多的待測物，并直接在其表面進行酶顯色、熒光或同位素顯示，從而建立了一系列檢測速度快、特異性高、靈敏度高和重復性好的免疫檢測方法。多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應用。

免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結合而沒有磁性，不在磁場中停留，從而使細胞得以分離。免疫磁珠應用分為正選法和負選法：正選法－磁珠結合的細胞就是所要分離獲得的細胞負選法－磁珠結合不需要的細胞，游離于上清液的細胞為所需細胞，一般而言，負選法比正選法的磁珠用量大磁珠：大小在0.1－0.45mm包被了生產的高質量單抗磁珠已為白細胞亞群的分選所優化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細胞懸液，磁珠特異性地與有相應抗原的細胞亞群結合，通過分離得到的連有磁珠的細胞可直接用于功能試驗和用流式細胞儀檢測。H9亞型禽流感病毒免疫磁珠分離方法初步建立。吉林COIP免疫磁珠哪家好

抗原肽免疫磁珠檢測BLV抗體的研究。陜西COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

從臍血中分離,培養血管內皮祖細胞,研究內皮祖細胞的生長特性和誘導分化條件.方法:應用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術及形態學(光鏡,電鏡)觀察研究內皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養基中,觀察內皮祖細胞的生長特性.結果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內,培養1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結構,電鏡觀察可見胞漿內典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養14d后細胞表面抗原表達情況:與培養開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.陜西COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

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