Anti Flag COIP磁珠

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產品描述

BEENbio Anti Flag COIP磁珠在大小為1um的納米磁珠上供價結合了大量的小鼠Anti Flag單克隆抗體，與傳統的Anti Flag COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節省40%的時間。

產品特性

儲存條件

4^oC長期穩定，

使用說明

磁珠的準備

重懸Anti Flag 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。

樣品的結合（binding）

在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。

結合過程中，磁珠可能會出現聚團或呈片狀，屬于正常現象，不會影響實驗結果。

洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。

洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進行SDS-PAGE檢測。 基于免疫磁珠分散聚集狀態檢測病原體與Cancer癥標志物。湖南蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠批量定制

羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數量和特性.結果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%～3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養9～14d,CD34+細胞在液體培養中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養,可產生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.黑龍江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠供應商免疫磁珠法富集循環腫瘤細胞研究進展。

COIP常見問題及對策

1：如何提高抗體與磁珠結合效率?

磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關，請確 認抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間（ 30～120min）、提高結合緩沖液的pH值（8～9）及降低離子強度（ 25～100mM NaCl）等方法提高親和效率。

2：如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?

可以先將抗體與樣品進行孵育，形成抗體-抗原復合物，再用 Protein A/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效 率，并降低磁珠與樣品接觸的時間，從而提高沉淀產物的特異性。對 于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。

免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結合10 min達到平衡,其比較大結合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。

免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結合而沒有磁性，不在磁場中停留，從而使細胞得以分離。免疫磁珠應用分為正選法和負選法：正選法－磁珠結合的細胞就是所要分離獲得的細胞負選法－磁珠結合不需要的細胞，游離于上清液的細胞為所需細胞，一般而言，負選法比正選法的磁珠用量大磁珠：大小在0.1－0.45mm包被了生產的高質量單抗磁珠已為白細胞亞群的分選所優化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細胞懸液，磁珠特異性地與有相應抗原的細胞亞群結合，通過分離得到的連有磁珠的細胞可直接用于功能試驗和用流式細胞儀檢測。BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。黑龍江COIP免疫磁珠送貨上門

人骨關節炎關節軟骨間充質祖細胞的免疫磁珠分選和鑒定。湖南蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠批量定制

免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀80年代出現的技術方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應，在細胞表面形成玫瑰花結，這些結合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下，就會與其他未被結合的細胞分群，具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標記的細胞，從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術已經***運用于細胞及分子生物學，分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞，從而決定了這一方法在神經干細胞分選中應用的技術可行性。湖南蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠批量定制

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