免疫磁珠(Immunomagneticbead,IMB)技術是20世紀80年代出現的技術方法。以免疫學為基礎,滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化及分子遺傳學等各個領域,其在免疫檢測、細胞分離、生物大分子純化和分子生物學等方面有著越來越***的使用。免疫磁珠的結構:磁珠是由**金屬顆粒(Fe2O3,Fe3O4),**外層包裹的高分子材料(如聚苯乙烯、聚氯乙烯)和**外層的功能配基(如-NH2,-COOH、-OH、-CHO)組成。免疫磁珠在生物醫學領域的應用:1.細胞分選,2.蛋白質/抗體分離與純化。3.核酸分離純化核酸結合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。4.免疫檢測免疫磁珠由于粒徑小,比表面積大,可捕獲較多的待測物,并直接在其表面進行酶顯色、熒光或同位素顯示,從而建立了一系列檢測速度快、特異性高、靈敏度高和重復性好的免疫檢測方法。那么免疫磁珠的優勢都有哪些呢?湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
免疫磁性細胞分選系統分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統,通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產物中的陽性細胞數,分離細胞的總細胞數×100%,細胞回收率:分離產物中的陽性細胞數,起始標本陽性細胞總數×100%。廣東蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠哪家好上海普平生物科技有限公司免疫磁珠的售后服務很好。
探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.
免疫磁珠技術(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內外研究的一種新的免疫學技術.隨著納米技術的不斷發展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細胞活性等優點,因此它能從大量外周血細胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結合能力;選擇6種不同的偶聯緩沖溶液,設置了6個主要偶聯時間和6組偶聯溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯條件.結果:制備的多克隆抗體效價為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯2h,偶聯抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達77.0%.結論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規的平皿增菌培養顯色法比較,檢測時間至少縮短20h.標記的腫瘤細胞免疫磁珠多種系列供您選擇。
免疫磁珠法原代分離純化大鼠視網膜微血管周細胞,并確定其免疫組化特征.方法免疫磁珠法結合傳統的膠原酶消化及篩網過濾法分離出大鼠視網膜微血管周細胞,采用含有20%胎牛血清的DMEM培養.通過周細胞的形態和生長方式初步鑒別,再進行細胞α-SMA,vWF,GFAP抗體免疫組織化學特征鑒定,及激光共聚焦顯微鏡行周細胞PDGFR-β和desmin抗體熒光雙標觀察.周細胞生長曲線通過MTT法測定.結果本法獲得的周細胞純度可達98%,并能連續傳代.原代周細胞約2~3周融合,傳代后生長和融合速度加快,細胞形態不規則,胞內可見絲狀結構,無接觸性抑制.免疫組化證實周細胞胞漿內α-SMA蛋白表達陽性,內皮細胞特異性vWF因子表達陰性,膠質細胞特異性GFAP表達陰性.激光共聚焦顯示周細胞PDGFR-β和desmin抗原表達均為陽性.結論本研究***報道應用免疫磁珠法分離培養大鼠視網膜微血管周細胞.獲得高度純化的周細胞具有明確的免疫組化特征,可用于相關視網膜血管性疾病的進一步研究.使用免疫磁珠的好處您了解多少呢?北京anti-Flag COIP免疫磁珠哪家好
一個好的免疫磁珠需要具備哪些特點您了解嗎?湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
磁珠分離細胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達,進一步了解DPSC的表型特點及與EMSC的相關性,為今后研究提供較為純化的細胞來源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標法檢測抗原HNK-1、Nestin的表達。結果磁珠分離前后進行細胞計數,大約有5%的DPSC為STRO-1+的細胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測同時表達HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測顯示也同時表達HNK-1(++)、Nestin(++)。結論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽性的DPSC共表達EMSC的標記HNK-1和Nestin,進一步說明二者作為間充質來源的干細胞,細胞表型具有繼承性。湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
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