COIP常見問題及對策1:如何提高抗體與磁珠結合效率?磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關,請確認抗體的類型與ProteinA/G配基的親和效率。如抗體所屬亞型與ProteinA/G的親和度較低,可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間(30~120min)、提高結合緩沖液的pH值(8~9)及降低離子強度(25~100mMNaCl)等方法提高親和效率。2:如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?可以先將抗體與樣品進行孵育,形成抗體-抗原復合物,再用ProteinA/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效率,并降低磁珠與樣品接觸的時間,從而提高沉淀產物的特異性。對于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。上海普平生物科技有限公司專業致力于免疫磁珠直銷。北京protein A/G COIP免疫磁珠供應商
免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養人骨髓來源多能成體祖細胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細胞,在自制培養基下貼壁培養后,將獲取的骨髓貼壁細胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負分選,錐蟲藍拒染實驗計數MACS分選前后細胞活力.流式細胞儀鑒定分選后細胞純度;流式細胞儀分析培養細胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達情況.結果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細胞純度大于98%;流式細胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達細胞比率為99.2%,CD44陽性細胞比率為98.3%,CD34陽性細胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細胞比率為5.3%.結論:CD45,GlyA免疫微磁珠負分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養基中有較強的增殖能力.甘肅anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制免疫磁珠的系列有很多種。
建立有效的人類神經干細胞分離純化系統和方法.方法:無菌取孕24周流產胎兒的室下區腦組織,制備細胞懸液,用磁性微珠標記的CD133單克隆抗體與細胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細胞,通過體外培養并誘導分化,觀察CD133陽性細胞和陰性細胞的增殖情況及分化能力.結果:經免疫磁珠分選的室下區腦組織中,CD133(+)細胞占胚胎腦組織細胞的2%左右,該細胞體外擴增能力強,細胞呈球形生長,并易聚集成團,培養5d,10d,15d,20d進行活細胞計數,細胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導分化后的細胞經染色鑒定可分化為神經元,神經膠質等多種神經細胞,陰性細胞擴增能力弱,活細胞計數以死細胞數量居多,大約705,另外一些細胞貼壁分化.結論:免疫磁珠法簡便,有效,經免疫磁珠分離的神經干細胞在體外能進一步培養擴增并分化.
一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測的方法及測試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預處理;活化磁珠;偶聯抗體的制作;對偶聯抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測的方法是:利用免疫學反應夾心法,競爭法以及間接法檢測不同物質的存在,并在測試板上設置對照體系:測試板由包被試紙條,偶聯墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準確,不受光學因素干擾,磁信號穩定,不易衰減,試劑簡單,穩定,低廉,檢測快速,適合現場檢測等特點.免疫磁珠批發就找上海普平生物科技有限公司。
建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優化免疫磁珠法的反應條件,考察其精密度和特異性。收集經血培養確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結果進行比較。結果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內、批間變異系數(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應用價值。想要買免疫磁珠?您要先了解免疫磁珠的特點。甘肅anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
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偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強作用.方法:經尾靜脈注射SPC-A1-luc細胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發光成像定量監測**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進行micro-CT掃描.利用免疫組織化學驗證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達.結果:免疫磁珠組在第4周即可檢測到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統計學意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無統計學意義(均P0.05).結論:偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強作用,并且有望用于肺*的早期診斷.北京protein A/G COIP免疫磁珠供應商
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