應用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細胞,并做培養鑒定.方法采用STRO-1為標記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細胞,觀察細胞形態及生長情況,流式細胞儀檢測細胞表型,并檢測細胞體外多向分化能力.結果應用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細胞可獲得乳牙牙髓干細胞,經統計學處理證明看其生長速度慢于牙髓細胞,細胞表型分析證實CD29,CD105高表達,CD34,CD45低表達.礦化誘導和成脂誘導證實STRO-1+乳牙牙髓細胞具有干細胞多向分化的能力.結論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細胞的方法.所分離的細胞具有干細胞的表型特點及多向分化能力.上海普平生物科技有限公司的免疫磁珠產品種類繁多。遼寧COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.江蘇anti-HA COIP免疫磁珠生產廠家免疫磁珠的各種系列應用領域還是不一樣的。

羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數量和特性.結果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%～3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養9～14d,CD34+細胞在液體培養中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養,可產生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.

常見問題及對策5：磁珠在使用過程中出現結塊現象？磁珠在使用時如果出現結塊現象一般較難振蕩打散，容易導致分布不均，出現該問題的原因是磁珠在磁場中放置太久而使磁珠牢固的結合在一起。用超聲波水浴處理2min即可打散磁珠使其重新分散，但應注意超聲處理也會使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落，所以磁珠在加樣后洗脫前不宜使用該方法。緩沖液匯總Co-IP&CHIP磁珠緩沖液匯總：細胞裂解液：正常RIPA細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)抗體磁珠結合buffer：PBST(1*PBS+1%TritonX-100)Washingbuffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)抗原與抗體/磁珠復合物bindingbuffer：可以用RIPA細胞裂解緩沖液代替Washingbuffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)6、Elutionbuffer:(1)變性洗脫緩沖液，直接加入1*蛋白loadingbuffer,98oC5min后棄去磁珠后，收集上清液檢測。（2）非變性洗脫緩沖液：Elutionbuffer:0.1M-0.2MGlycine,0.1%-0.5%Triton100orTween20,pH2.5-3.1。免疫磁珠的優缺點您知道嗎？

免疫共沉淀（COIP）實驗過程（1）轉染后24-48h可收獲細胞，加入適量細胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min,細胞裂解液于4°C，最大轉速離心30min后取上清；（2）取少量裂解液以備Westernblot分析，剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過夜；（3）取10μlproteinA瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3次，每次3,000rpm離心3min；（4）將預處理過的10μlproteinA瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與proteinA瓊脂糖珠耦聯；（5）免疫沉淀反應后，在4°C以3,000rpm速度離心3min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；***加入15μl的2×SDS上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；（6）SDS-PAGE,Westernblotting或質譜儀分析。注意的問題：（1）細胞裂解采用溫和的裂解條件，不能破壞細胞內存在的所有蛋白質－蛋白質相互作用，多采用非離子變性劑（NP40或TritonX-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的，通過經驗確定。不能用高濃度的變性劑（0.2%SDS)，細胞裂解液中要加各種酶抑制劑，如商品化的cocktailer。（2）使用明確的抗體，可以將幾種抗體共同使用。（3）使用對照抗體：免疫磁珠的特點成為了一個重要因素。浙江蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠銷售

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免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133^+細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜生長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.遼寧COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

上海普平生物科技有限公司致力于化工，是一家招商型的公司。公司自成立以來，以質量為發展，讓匠心彌散在每個細節，公司旗下科研試劑、耗材、儀器，納米脂質體，細胞、分子、蛋白實驗，科研項目深受客戶的喜愛。公司秉持誠信為本的經營理念，在化工深耕多年，以技術為先導，以自主產品為重點，發揮人才優勢，打造化工良好品牌。普平生物憑借創新的產品、專業的服務、眾多的成功案例積累起來的聲譽和口碑，讓企業發展再上新高。