免疫磁珠法(MACS):免疫磁珠法是2O世紀80年代出現的技術方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選,1990年,Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應,在細胞表面形成玫瑰花結,這些結合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下,就會與其他未被結合的細胞分群,具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性,這樣就可以篩選或去除所標記的細胞,從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術已經***運用于細胞及分子生物學,分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞,從而決定了這一方法在神經干細胞分選中應用的技術可行性。免疫磁珠的各種系列應用領域還是不一樣的。廣東蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
常見問題及對策3:如何避免磁珠在儲存或使用過程中可能出現的聚集情況?磁珠應保存在2~8℃,使用時應避免由于污染而導致的不可逆聚集,或因干燥而導致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發生聚集屬于正常現象,不影響磁珠的正常使用。在Bindingbuffer和Elutionbuffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或TritonX-100)可有效防止磁珠聚集。經過低pH洗脫操作的磁珠可以用結合緩沖液洗滌至中性,然后用含有0.1%(v/v)Tween-20的Trisbuffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠,并用超聲波水浴處理2min,即可使磁珠恢復均勻狀態,以上處理均不影響磁珠的抗體結合效率。4:如何解決磁珠易粘附管壁的現象?建議使用低吸附率的耗材進行磁珠操作。另外,在緩沖液中添加0.01%~0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或TritonX-100)可以有效降低磁珠對耗材的粘附。黑龍江COIP免疫磁珠送貨上門免疫磁珠的優點有很多。
戊二醛兩步交聯法將辣根過氧化物酶(HRP)結合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質量鑒定結果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規范化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.
骨髓間充質干細胞在一定條件下可分化成為多種結締組織細胞,也可分化成神經系統的神經元和神經膠質細胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經干細胞的生物學特征.設計,時間及地點:以患者自身骨髓組織為觀察對象的實驗,于2003-03/2007-06在菏澤市立醫院檢驗科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫院神經內科住院的中風,老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經系統疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經干細胞抗原相結合,在磁場作用下使結合磁珠與其他細胞分離,從而獲得神經干細胞,再將所分離的純化神經干細胞接種到含體積分數為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養液,再在培養基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進行原代培養.主要觀察指標:采用免疫組織化學染色與免疫熒光染色鑒定細胞,并采用流式細胞術測定細胞DNA含量.結果:在相差顯微鏡下觀察培養的神經干細胞,細胞形態豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經突起粗大,網絡稠密.免疫組織化學和免疫熒光染色顯示,細胞神經元特異性烯醇化酶,神經蛋白,膠質纖維酸性蛋白酶,微管相關蛋白為陽性.傳代后的細胞用流式細胞術測定DNA含量為正常二倍體,無誘發突變.免疫磁珠的主要特點都有哪些呢?
免疫磁珠分選CD34+細胞及臍血中CD34+細胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細胞后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細胞,流式細胞儀檢測分選前后CD34細胞的純度.[結果]分選前MNC中CD34+細胞純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細胞純度達到(91.55士4.11)%.[結論]臍血作為CD347造血干/祖細胞的來源以及免疫磁珠方法在獲得高純度CD34+細胞中有重要的意義.免疫磁珠分選CD34+細胞及臍血中CD34+細胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細胞后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細胞,流式細胞儀檢測分選前后CD34細胞的純度.[結果]分選前MNC中CD34+細胞純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細胞純度達到(91.55士4.11)%.[結論]臍血作為CD347造血干/祖細胞的來源以及免疫磁珠方法在獲得高純度CD34+細胞中有重要的意義.上海普平生物科技有限公司專業致力于免疫磁珠銷售。黑龍江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售
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檢測EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環腫瘤細胞中表達的相關性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測組、MUC16免疫磁珠檢測組、2種磁珠均等混合檢測組。對來源于同一患者的等體積外周血樣本進行循環腫瘤細胞檢測,HE染色后鑒定檢測值。結果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對同體積、同來源樣本檢測值分別為22±11、14±6、28±12個腫瘤細胞(P0.05),說明檢測效率有統計學差異。結論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環腫瘤細胞中**表達且存在差異,因此增加MUC16這一***標志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數量。廣東蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
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