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廣東anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠供應商

來源: 發布時間:2022-05-06

建立免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜牛長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.免疫磁珠多種系列供您選擇。廣東anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠供應商

免疫共沉淀(COIP)優點(1)相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的,處于天然狀態;(2)蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的,可以避免人為的影響;(3)可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。免疫共沉淀(COIP)缺點(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質-蛋白質相互作用;(2)兩種蛋白質的結合可能不是直接結合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;(3)必須在實驗前預測目的蛋白是什么,以選擇***檢測的抗體,所以,若預測不正確,實驗就得不到結果,方法本身具有冒險性。(4)靈敏度沒有親和色譜高。天津anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起一個好的免疫磁珠需要具備哪些特點您知道嗎?

COIP常見問題及對策1:如何提高抗體與磁珠結合效率?磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關,請確認抗體的類型與ProteinA/G配基的親和效率。如抗體所屬亞型與ProteinA/G的親和度較低,可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間(30~120min)、提高結合緩沖液的pH值(8~9)及降低離子強度(25~100mMNaCl)等方法提高親和效率。2:如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?可以先將抗體與樣品進行孵育,形成抗體-抗原復合物,再用ProteinA/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效率,并降低磁珠與樣品接觸的時間,從而提高沉淀產物的特異性。對于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。

碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯抗體,制備可高效分離細胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進行反應,從而將抗體偶聯于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯接的抗體量及其免疫活性.結果HPPS檢測磁珠平均水力學粒徑為110nm;磁珠表面偶聯52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經磁分離后細胞的流式分析結果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細胞系(KG-1a)細胞,免疫磁珠均勻結合于細胞表面,且不影響細胞的活性.結論成功制備可用于細胞分離且不影響分離后細胞活性的新型免疫磁珠.上海普平生物科技有限公司就帶您了解一下免疫磁珠的特點。

分離轉基因小鼠骨髓造血干細胞.運用針對小鼠干細胞表面特異表達的干細胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細胞,用流式細胞術(FACS)檢測MACS分離后骨髓細胞中干細胞(Sca-1陽性細胞)比例,監測細胞分選效果.結果顯示MACS分離后骨髓細胞中Sca-1陽性細胞所占比例達85%以上,涂片觀察發現細胞組成和細胞形態學特征與FACS所得結果一致.MACS可以從轉基因小鼠全骨髓細胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細胞,細胞純度可達85%以上.想要買免疫磁珠?您要先了解免疫磁珠的特點。廣東anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠銷售

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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在agarosebeads上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內結合的蛋白質B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離,對B蛋白進行檢測,進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的,符合體內實際情況,得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。廣東anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠供應商

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