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北京高同源SNP分型怎么解決

來源: 發布時間:2022-02-21

為了獲得更多糖原相關SNP位點,作者選擇了包括Cg_GD1基因在內的5個基因,64個個體(32個高糖原個體和32個低糖原個體)進行重測序,,后得到732個高質量SNP。其中32個位于Cg_GD2基因,256個位于Cg_GS基因,用于后續的關聯分析。結果顯示有兩個SNP與糖原含量有關。分別是位于Cg_GD1基因第15個內含子的SNP(Cg_SNP_3021(R(A/G))),和位于Cg_GD1基因的SNP(Cg_SNP_3021)。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,是上海市****,至今已有十六年歷史。目前在nature genetics和cell這樣的雜志,也不乏SNP的文章。北京高同源SNP分型怎么解決

將待檢測片段(包含待測SNP位點)進行PCR擴增并直接進行測序是SNP檢測方法中,準確的一種,堪稱SNP分型的“金標準”。獲得測序峰圖,純和位點為單峰,而雜合位點則為套峰,因此通過查看測序峰圖很容易將基因型區分開來。直接測序法不僅可用于對已知位點的檢測,還可用于發現未知的SNP位點。直接測序法的優點是結果準確,能發現未知位點,但是其缺點是通量低,成本高。因此直接測序法適用于少位點,少樣本的分型規模,當然土豪實驗室除外!所以這種方法也很難在商業化大規模的分型實驗中得到推廣。山東分型哪個公司做目前已有多種方法可用于SNP檢測,如根據動態等位基因特異的雜交、DNA芯片以及TaqMan系統等。

競爭性等位基因特異性PCR法——KASP(KompetitiveAlleleSpecificPCR),是英國LGC(**化學家實驗室)公司所開發的技術,被比較常見用于少位點,多樣本的SNP分型中,與TaqMan熒光探針法有一定相似性。KASP基于引物末端堿基的特異匹配來對SNP分型以及檢測InDels(InsertionsandDeletions,插入和缺失)。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,是上海市****,至今已有十六年歷史,專注于為國內科研工作者和生物醫藥企業提供各類分子遺傳學技術服務(高同源區段SNP分型)和質控試劑盒。

單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphism,SNP),主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態性。它是人類可遺傳的變異中,常見的一種。占所有已知多態性的90%以上。SNP在人類基因組中比較常見存在,平均每500~1000個堿基對中就有1個,估計其總數可達300萬個甚至更多。SNP所表現的多態性只涉及到單個堿基的變異,這種變異可由單個堿基的轉換(transition)或顛換(transversion)所引起,也可由堿基的插入或缺失所致。但通常所說的SNP并不包括后兩種情況。.高同源區段在多倍體物種中,又細分為橫向同源和部分同源。

上海翼和生物根據具體實驗規模,提供兩種檢測平臺,分別為:適合中低通量檢測的PCR-LDR分型服務和適合高通量的基于二代Hi-SNP分型服務。PCR-LDR SNP分型服務:PCR-LDR技術是PCR技術和LDR(Ligase Detection Reaction,連接酶檢測反應)想結合的檢測技術。LDR是利用高溫連接酶實現對基因多態性位點的識別。高溫連接酶一旦檢測到DNA與互補的兩條寡聚核苷酸接頭對應處存在著基因點突變類型的堿基錯配,則連接反應就不能進行,反之則可以進行連接反應。Hi-SNP結合多重PCR技術和高通量測序技術,對需要檢測的位點設計特異性引物,在單管內進行多重PCR擴增,不同的樣本以不同的Barcode引物區分。混合樣本后,在illumina 等主流測序平臺上,對擴增子進行高通量測序。測序結果使用生物信息學方法,區分不同的樣本,,終獲得每個位點的SNP信息。高通量測序能一次對幾百萬條DNA分子進行序列測定,相比其他的SNP檢測技術,基于高通量測序的SNP分型具有更準確、更靈敏的特點。SNPs是英文Single nucleotide polymorphisms的縮寫。安徽高同源分型

高同源序列帶來的直接挑戰:同源序列的干擾,無法利用簡單PCR技術或者探針雜交捕獲技術,將目標區段富集。北京高同源SNP分型怎么解決

RFLP法的優點是分型技術簡單,結果判斷容易,不需要昂貴的設備,成本低,并且實驗人員培訓簡單。但是通過SNP能夠導致RFLP的概率低,很多SNP位點不能采用這種方法進行檢測,而且有的限制性酶價格昂貴并且不容易買到。通常酶切的條件較高,容易出現假陽性結果,且工作量大,耗時長,通量低。這是早期的一種SNP分型技術,在通量和效率上難以滿足批量分型需求,因此這種技術目前只在個別實驗室中還在使用中。上海翼和應用生物技術有限公司北京高同源SNP分型怎么解決

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