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北京高同源序列SNP分型送樣要求

來源: 發(fā)布時間:2021-12-10

TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針,熒光基團連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應體系中加入2種不同熒光標記的探針,它們可以分別與2個等位基因完全配對。正常情況下,由于探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團緊鄰在一起,熒光被淬滅。隨著PCR有效的進行,與模板完全配對的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割,致使探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團分離,淬滅效應解除,報告熒光基團被***,檢測到熒光信號,相反,如果模板不能完全配對的探針(**另一種等位基因)不能被有效切割,因此檢測不到熒光信號,從而實現(xiàn)SNP位點的分型檢測。但是當位點數(shù)和樣本量都比較大的時候,長片段PCR增加成本,工作量也非常龐大了。北京高同源序列SNP分型送樣要求

RFLP法的優(yōu)點是分型技術簡單,結果判斷容易,不需要昂貴的設備,成本低,并且實驗人員培訓簡單。但是通過SNP能夠?qū)е翿FLP的概率低,很多SNP位點不能采用這種方法進行檢測,而且有的限制性酶價格昂貴并且不容易買到。通常酶切的條件較高,容易出現(xiàn)假陽性結果,且工作量大,耗時長,通量低。這是早期的一種SNP分型技術,在通量和效率上難以滿足批量分型需求,因此這種技術目前只在個別實驗室中還在使用中。上海翼和應用生物技術有限公司廣州高同源序列SNP分型哪里好SNP分型遇到高同源區(qū)段怎么辦?翼和生物自主研發(fā)多重長片段巢式PCR技術,解決高同源區(qū)段SNP分型難題。

SNP基因分型技術原理是PCR擴增含有SNP的基因組片段,主要特點是準確性高、靈活性強、通量大,主要方法是TaqMan探針法。首先通過PCR擴增含有SNP的基因組片段,然后通過序列特異性引物實現(xiàn)單堿基延伸,隨后樣品分析物與芯片基質(zhì)共結晶后在真空管中受瞬時納秒 (10-9s) 強激光激發(fā)。核酸分子因此解吸附成為單電荷離子,由于電場中離子飛行時間與離子質(zhì)量成反比,通過檢測核酸分子在真空管中的飛行時間而獲得樣品分析物的精確分子量,從而檢測出SNP位點信息。

SNP指的是DNA序列上發(fā)生的單個核苷酸堿基之間的變異。SNP根據(jù)所處核酸位置不同,其預測的生物學功能不同,可以分為有***生物學意義和無***生物學意義的SNP。有生物學意義的SNP往往影響蛋白結構,表達,剪切等。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,至今已有十六年歷史,專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學技術服務和質(zhì)控試劑盒?;谧灾髦R產(chǎn)權的多重PCR技術,翼和生物研發(fā)和改良了適用于熒光定量PCR、一代測序和二代高通量測序平臺的多種檢測技術和產(chǎn)品,逐步形成了在細胞組織和動物模型質(zhì)控、大健康檢測和科學研究3大板塊產(chǎn)品布局。在精細定位、分子育種過程中遇到高同源區(qū)段SNP,并且無法舍棄時,翼和生物提供特色的解決方案,歡迎來撩!

理論上講,SNP既可能是二等位多態(tài)性,也可能是3個或4個等位多態(tài)性,但實際上,后兩者非常少見,幾乎可以忽略。通常所說的SNP都是二等位多態(tài)性的。這種變異可能是轉換(C T,在其互補鏈上則為GA),也可能是顛換(CA,GT,CG,AT)。轉換的發(fā)生率總是明顯高于其它幾種變異,具有轉換型變異的SNP約占2/3。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,是上海市****,至今已有十六年歷史,專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學技術服務(高同源區(qū)段SNP分型)和質(zhì)控試劑盒。根據(jù)高同源區(qū)段位點數(shù)量,提供多重長片段巢式PCR-LDR SNP分型和多重長片段巢式PCR-NGS SNP分型兩種解決方案。浙江高同源序列分型公司

SNP所表現(xiàn)的多態(tài)性只涉及到單個堿基的變異,這種變異可由單個堿基的轉換或顛換所引起。北京高同源序列SNP分型送樣要求

競爭性等位基因特異性PCR法——KASP(KompetitiveAlleleSpecificPCR),是英國LGC(**化學家實驗室)公司所開發(fā)的技術,被比較常見用于少位點,多樣本的SNP分型中,與TaqMan熒光探針法有一定相似性。KASP基于引物末端堿基的特異匹配來對SNP分型以及檢測InDels(InsertionsandDeletions,插入和缺失)。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,是上海市****,至今已有十六年歷史,專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學技術服務(高同源區(qū)段SNP分型)和質(zhì)控試劑盒。北京高同源序列SNP分型送樣要求

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