酵母文庫實驗由歐易生物完成。2021 年 3 月,山東農業大學郝玉金教授為通訊作者,在 Plant Physiology 雜志(IF: 6.902)在線發表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文,深入探討了硝酸鹽介導的蘋果生長調控分子機制。氮素是植物生長發育所必須的營養物質之一,硝酸鹽是植物根系吸收無機氮的主要形式。除了營養功能,硝酸鹽還可以通過多種信號途徑來調節植物生長和發育過程。赤霉素(gibberellin,GA)是一種植物***,同樣可以調控植物生長發育過程。然而,硝酸鹽和赤霉素信號通路如何共同調節植物生長的確切分子機制仍知之甚少。篩選酵母文庫選歐易生物技術可靠服務高效多年經驗。黑龍江發展酵母文庫報價
酵母雙雜交(Y2H):植物轉錄因子(Plant transcripter factors, TFs)是調控植物生長發育和環境適應性的關鍵分子。雖然在一些數據庫中,如RiceSRTFDB (Priya and Jain, 2013), Ricettissuetfdb (Chen et al.,PlnTFDB (Pérez-Rodríguez et al., 2009)和PlantTFDB (Jin et al., 2017),可以預測水稻轉錄因子功能。但通過具體實驗研究,來直接證實轉錄因子對植物的調控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交(Y2H)和酵母單雜交(Y1H)是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術。為了方便和促進水稻育種研究,陳凡老師與歐易生物達成合作,整合雙方優勢資源,歷經春秋與冬夏,成功構建了基于粳稻(日本晴)基因組的水稻轉錄因子文庫。該項成果以“一種高效的篩選系統來鑒定大米轉錄因子的蛋白質-蛋白質或蛋白質-DNA相互作用伙伴”為題,發表于雜志JGG上。山西酵母文庫質量什么是酵母文庫的構建? 只需構建自己需要研究蛋白的BD載體,就能和本司**儲備的酵母文庫進行篩庫實驗。
酵母文庫實驗:本研究發現了一個硝酸鹽響應的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調節硝酸鹽介導的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質 pull-down、BiFC 實驗證實,MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達 MdBT2 部分回復了 MdRGL3a 過表達所導致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導的植物生長。實驗室培養顯示,培養 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。
通過傳統的酵母雙雜交系統,以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進行PCR擴增,并將所有的PCR產物進行純化。使用純化后的PCR產物,進行打斷后構建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數據。通過分析二代測序數據,獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,包含21個TFs,2個TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進行一對一驗證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網絡進行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達譜、啟動子中的順勢作用元件功能進行分析,并對DIPs進行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結果,構建針葉樹老化途徑的調控模型(圖4)。酵母文庫是歐易生物***服務項目。
文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物協助完成。近日,上海交通大學/復旦-交大-諾丁漢植物生物技術研發中心主任唐克軒課題組在New Phytologist(IF:8.512)發表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文,揭示了青蒿轉錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號所介導的青蒿素生物合成調控的新型分子機制,本研究通過藍/紅光誘導青蒿中青蒿素生物合成基因的表達,使用轉錄組分析確定了一個WRKY轉錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關基因的表達。酵母雜交技術是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測的技術。黑龍江發展酵母文庫報價
酵母單雜篩庫酵母文庫篩選酵母雙雜交篩庫步驟。黑龍江發展酵母文庫報價
酵母文庫實驗:MAPK級聯***是植物防御病原體入侵信號傳導過程中的關鍵事件,MAPKs靶向并磷酸化調節下游基因轉錄的轉錄因子,**終響應病原菌的侵入。WRKYs轉錄因子是MAPK級聯的重要目標,在植物對各種病原體的抗性中起著關鍵作用。蘋果如何響應炭疽菌入侵,將信號傳導到細胞內,以及哪個轉錄因子負責協調促進GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發現了一個由蘋果炭疽菌******誘導的轉錄因子MdWRKY17。在6個易感蘋果種質中,MdWRKY17表達水平***高于6個耐受蘋果種質,同時對應的水楊酸含量降低,證實了MdWRKY17介導的水楊酸降解在GLS耐受中的關鍵作用。黑龍江發展酵母文庫報價
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