針對單細胞測序的細胞上樣數，為什么不建議捕獲到的細胞數量越高越好？一味地追求高數量的細胞捕獲可能會存在一些問題。例如在上機細胞懸液濃度固定時，如果目標細胞捕獲數增加到8000甚至10000，上樣細胞懸液體積勢必增加，在細胞懸液質量不是很理想（細胞活性<90%、碎片率>5%、結團率均>5%）的情況下，引入的背景信號會增加，分析結果不理想的直接體現包括：cell、non-cell無法有效區分和Fraction reads in cells偏低。當cell和non-cell無法有效區分時，會使得數據出現假陽性和假陰性結果！當目標細胞捕獲數很大時，多細胞率會增加，數據分析時，此部分“cell”表現為基因檢測數和UMI檢測數是正常cell的N倍（N是一個GEM包裹的細胞數），導致所有細胞的統計數據（單個細胞基因檢測中位數、單個細胞UMI檢測中位數）虛高。此部分“cell”雖然可以通過設置數據分析閾值進行過濾，但是容易會有此類數據的殘留和正常高基因檢測細胞的人為去除！附加流式分選細胞表面Marker，對于較低分辨率的標志物也能有效鑒定，助力高要求測序項目。北京二代測序單細胞測序數據分析可視化

單細胞獲得困難，不同組織要求不盡相同難以搞定？ 烈冰2000+項目消化經驗，100+組織類型解離protocol，精心設計不同組織實驗的解離、細胞懸浮實驗體系，確保單細胞的獲得。 凍存樣本無法實驗，珍貴樣本無法使用？ 烈冰采用國際認可的凍存組織復蘇技術以及死細胞過濾技術，確保凍存組織使用。 珍貴樣本，細胞數量太少，消化背景雜無法做單細胞？ 采用國際認可的10X Genomics，BD Rhapsody雙平臺模式，根據樣本實際情況和用戶需求提供客觀有效的實驗方案,細胞量少，背景雜也能做單細胞。 單細胞RNA分類精度不足，部分細胞無法細分？ 烈冰同時采用單細胞蛋白質組與單細胞轉錄組測序技術，真正做到從上游到下游的全流程檢測，確保超高的細胞分類精度。吉林單細胞測序價格單細胞測序平臺，烈冰提供高性價比服務方案。

一味的追求高細胞數量的捕獲，小心得不償失，原因在這：單細胞測序所有的分析都是基于細胞聚類進行，而細胞聚類是在區分cell和non-cell后，獲得細胞基因表達譜，通過降維（pca），無監督聚類以及可視化（t-SNE）得到的。進行細胞聚類時需要考慮到每個細胞的基因表達模式，因此即使是相同的數據，在剔除幾個細胞的情況下，前后獲得的聚類圖也會出現明顯不同。而當細胞捕獲數過多時，無論是假陰性和假陽性數據還是多細胞數據，都會對正常細胞聚類產生影響，造成聚類結果失真。這也是很多文章，特別是很多高分文章，為什么單個樣本捕獲細胞數在2000-3000的原因了。烈冰建議單個樣本捕獲細胞數在3000-5000個時，數據量在100G左右時，可以滿足分析和文章發表的多重需求。

關于10X Genomics單細胞平臺的樣本類型和樣本制備 ：10X平臺在上機前需要注意細胞消化后的細胞團塊，獲得分離良好的細胞懸液、無細胞隨便、極少的細胞團塊，且細胞活力高（＞70%）；此外，了解您所研究細胞的大小范圍也很重要。細胞大小通常與細胞表達的轉錄本數量有關。各種尺寸不同的細胞（一般直徑不大于50μm）均可與我們基因表達解決方案中使用的10X Genomics平臺兼容。一般來說，細胞制備方案將根據組織來源和細胞類型而變化。每種組織類型都是獨特的，因此，必須在開始任何單細胞實驗之前優化樣本制備，烈冰多年樣本解離消化經驗，累積10+物種、50+組織的消化protocol，若您的樣本為組織，且尚未成功將組織樣本消化成單細胞懸液，烈冰將盡可能提供技術及實驗上的幫助。全線搭建10X Genomics Chromium Controller單細胞測序平臺。

所謂的高通量測序技術，又名大規模平行測序，是將 DNA（或者 cDNA）隨機片段化、加接頭，制備測序文庫，通過對文庫中數以萬計的克隆(colony)進行延伸反應，檢測對應的信號，獲取序列信息。與傳統測序法（Sanger法等）相比，高通量測序技術在處理大規模樣品時具有明顯的優勢，又快（兩天）又多（數百萬克?。蔀槟壳敖M學研究的主要技術。單細胞測序是一個系統的工程，開展項目前您可能會先評估它提供的見解是否與您的研究問題相匹配，如果匹配，實驗過程如何規劃，實驗平臺如何選擇，樣本如何制備，數據如何分析等等，而在這一切開始之前，我們的服務就已經開始了，從銷售到實驗到專業技術支持，我們開通全線對接渠道，幫助您快速定位項目訴求，提供從實驗設計到文章發表的全流程，我們始終是您貼心的科學合作伙伴。烈冰斥巨資引進Novaseq6000，開啟更大通量測序新紀元。吉林單細胞測序技術支持

烈冰生物全轉錄組測序通過雙文庫構建，實現多種RNA的一網打盡。北京二代測序單細胞測序數據分析可視化

烈冰生物搭建近10臺10XGemomics平臺，目前為全國范圍內的高校、醫院和研究所等單位的科研學者提供鼓舞，10X微流體“雙十字”交叉系統為8或16通道系統，每個通道上限可捕獲20000細胞，16通道一次可檢測細胞范圍為百萬級別的細胞水平。此外，單個細胞捕獲效率高達65%，可準確鑒別稀有細胞類型，利于稀有樣本或小細胞量類型樣本研究；細胞可適性高，對細胞大?。ㄖ睆匠^40um細胞需要制備成細胞核）及類型無限制。細胞捕獲周期較短，能夠實現自動分離，無需人工操作，1天內可完成從細胞懸液到cDNA文庫構建的所有的測序準備工作。北京二代測序單細胞測序數據分析可視化

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