cfDNA，cellfreeDNA，就是血液中游離的自身DNA，這些DNA多是從身體的細胞或者白血球破裂釋放出來的，基本上都是無害的，不用多久會被自身清理掉。不過值得一提的是，當孕婦懷孕的時候，胎兒的DNA也會同時釋放到母親的血液里頭去，這是當前火熱的無創唐氏篩查的基礎。通過抽取母親的外周血測序分析其中的游離DNA就可以判斷胎兒是否存在整個染色體或者大片段DNA的變異。有研究已經證實，**患者外周血中的cfDNA總量，要高于健康人。通過這一點，雖然不能武斷的說cfDNA能成為**標志物，但是cfDNA的含量增多，能起到一個較好的提示作用，作為一個初篩的手段。基于cfDNA的液態活檢中，盡管ctDNA在**診斷中的應用是當下cfDNA*****，研究**深入的分支。但是，cfDNA作為液態活檢，不只是局限于**學。例如，有研究報道對于接受***移植手術的病人，可以通過監測術后外周血中具有捐獻者基因特征，片段化的cfDNA含量變化，來評估移植***的排斥情況。 基于高通量測序平臺的甲基化圖譜分析。RIP-seq技術服務售后分析

Hepatic

stellate cell transdifferentiation involves genome-wide remodeling of the DNA

methylation landscape. J Hepatol. 2016;64(3):661-73. (IF= 14.911)

肝星狀細胞(HSC)是導致肝纖維化發生和進展的關鍵細胞類型。DNA羥甲基化與轉錄***有關，其模式在人類疾病中經常發生改變。研究者采用簡化基因組氧化-亞硫酸鹽測序(RRBS/oxRRBS)檢測靜止和******狀態的大鼠HSC細胞的5mC和5hmC水平，證實了5mC和5hmC在肝纖維化和HSC轉分化過程中的整體變化，表明DNA甲基化/羥甲基化是HSC***的關鍵步驟，可能會為支持纖維生成的分子事件帶來新的見解，并可能為疾病進展提供生物標志物以及潛在的新藥物靶點。 RIP-seq技術服務售后分析提供樣本DNA完整性質檢結果。

    N6-甲基脫氧腺苷(6mA)是原核生物和真核生物的DNA修飾類型之一，在細菌、藻類及植物基因組中***存在，在DNA錯配修復、染色體分離和毒力調節中發揮作用。6mA免疫沉淀測序(6mA-IPSeq)通過特異性抗體富集6mA甲基化的DN**段，然后結合高通量測序技術在全基因組水平上以較小的數據量，快速、高效地尋找6mA甲基化區域。技術優勢全基因組范圍鑒定6mA甲基化修飾區域技術方法適合所有物種(一般推薦藻類及植物)科學方案設計從項目背景了解、協助方案設計、實驗材料選取、建庫測序，到數據分析每個項目有特定的科學問題；需要專業、有價值的建議；科學、縝密的設計及時高效的溝通；以保障高質量研究成果樣本要求：基因組DNA:>=3ug；樣品濃度>50ng/ul；無RNA和蛋白污染建庫測序：測序策略：IlluminaHiSeq,PE150。

    亞硫酸鹽結合測序是DNA甲基化檢測的“金標準”方案。除了全基因組甲基化測序等研究手段，對于目標基因/位點檢測或者轉化醫學應用研究來說，需要靈活的靶向甲基化測序方案。BSP(BisulfiteSequencingPCR)結合高通量測序的TargetBisulfiteSequencing滿足幾個到上百個基因/位點的驗證需求,具有高通量、低成本的優勢,***用于臨床大樣本多位點的甲基化biomarker篩選及高水平文章甲基化驗證環節。微生物定植對腸道免疫和代謝相關基因DNA甲基化的影響——團隊成員發表.(IF=)我們以早產幼豬為模型，利用RRBS測序比較正常(n=7)和口服***(n=7)的腸道DNA甲基化差異，發現與先天免疫應答、吞噬和代謝等相關基因的DNA甲基化和表達存在***的差異，并通過高通量BSP測序對EGFL7、LBP8、PTPRE差異甲基化基因進行了驗證。 高通量BSP測序結果多種展示形式。

    RIP-seqRNAImmunoprecipitation是研究細胞內蛋白與RNA相互作用的技術，是了解轉錄后調控網絡動態過程的有力工具，能更有效地發現miRNA的調節靶點。這種技術運用針對目標蛋白的抗體把相應的RNA-蛋白復合物沉淀下來，然后經過分離純化就可以對結合在復合物上的RNA進行測序分析。RIP可以看成是普遍使用的染色質免疫沉淀RIP技術的類似應用，但由于研究對象是RNA-蛋白復合物而不是DNA-蛋白復合物，因此RIP實驗的優化條件與ChIP實驗并不相同。RIP實驗下游結合二代測序技術稱為RIP-seq，通過高通量測序和分析，深度解析與目標蛋白相互結合的RNA的區域或種類和相互作用強弱。應用領域1.高效獲取蛋白所結合的RNA，在全轉錄組范圍得到與蛋白有相互作用的RNA，包括mRNA、lncRNA、circRNA、microRNA。2.準確獲取蛋白結合RNA的特征，通過RNA結合區域的富集得到蛋白結合的RNA位置。3.通過motif分析獲取蛋白結合序列的偏好性。技術優勢***的確定蛋白質在細胞自然狀態下與RNA結合的研究手段，可以有效的鑒定一個蛋白是否是RNA結合蛋白以及RNA結合蛋白與哪些RNA直接作用，并確定其結合位點。，得知相互作用RNA的類型。，可通過分析可得知與蛋白作用的RNA序列。 不同的芯片平臺，各自的實驗過程也是不一樣的。浙江hMeDIP-Seq技術服務歡迎咨詢

甲基化驗證方案是TBS。RIP-seq技術服務售后分析

    **預防和***的一個手段是通過去甲基化恢復某些關鍵的抑*基因或DNA修復基因的活性，目前研究**多的是DNMTs***劑，它通過***DNMT活性以逆轉異常的DNA甲基化。**個表型修飾藥物為5-azacytidine及其類似物5-aza-2'-deoxycytidine（5-aza-CdR），這類藥物已經美國FDA批準用于白血病前骨髓增生異常綜合征的***。5-aza-CdR是胞嘧啶的類似物，在DNA復制過程中可以摻入到DNA鏈中，一方面它可以降低DNA接收甲基的能力，另一方面它***DNMT活性，導致DNA甲基化水平的降低。體外和體內試驗均表明，5-aza-CdR具有降低超甲基化的抑*基因甲基化水平從而*****的能力，臨床表明應用5-aza-CdR可提高部分IV期小細胞肺*患者生存率，但該藥也存在著不可忽視的毒副作用（如特異性不強，不能針對某一特定抑*基因進行靶向***；高劑量的5-aza-CdR可能誘發**的轉移），因此其在臨床上的應用受到了很大限制。也有研究表明，低劑量的As2O3可起到***肝*的目的。 RIP-seq技術服務售后分析