產品簡介：Transporter 5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物，這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞，并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率。適用于工藝開發、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業化生產。Transporter 5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒，所以較大的質粒也可以成功地轉染。 Transporter 5可節省試劑準備時間，加快項目進度。經過嚴格的性能檢測，確保品質，在新藥研發過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產的轉染試劑。產品特點：非GMP，研究級PEI轉染試劑溶液；高轉染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預測產量；用于工藝開發，臨床前和早期臨床研究。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！PEI轉染試劑可以轉染HEK293系列。可支持IND申報PEI轉染試劑試用裝可在哪里申請

注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?細胞轉染PEI轉染試劑試用裝有使用說明嗎哪個品牌的PEI轉染試劑比較好？

接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多PEI相關產品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！

材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃備用。1×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃備用。方法：1．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?PEI轉染試劑是線性的好還是分支的好？

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?誰知道Polysciences的轉染試劑怎樣？液體PEI轉染試劑試用裝低成本的選擇

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瞬時轉染方法1.接種細胞：轉染前，用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，總體積如表1所示，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定檢測時間。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物！可支持IND申報PEI轉染試劑試用裝可在哪里申請