核酸酶活性受到很多因素影響,如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此,不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前,生物制藥行業對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目,使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調整,同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細胞DNA(HCD)的去除效果更好、病毒載體得率更高。經過工藝優化后,可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2,且HCD去除效果及產品得率更高。東臺中鹽核酸酶款式哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。合肥70960-001中鹽核酸酶
市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規格,分別是25kU、500kU及5MU,分別滿足研發初期及大規模生產各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在99%以上。基于ArcticZymes Technologies的30年的酶學開發及大規模生產經驗,M-SAN HQ的生產體系穩定,產品純度高,批次一致性好,無蛋白酶活性。廠家開發出特異的緩沖液體系,使M-SAN HQ保存起來更加穩定,-15℃ - -30℃條件下保存4年沒有活性下降。研究數據表明,經過5-6次的反復凍融,M-SAN HQ中鹽核酸酶活性沒有明顯變化。金華70950-202中鹽核酸酶銷售電話M-SAN HQ中鹽核酸酶更適合細胞基因drug(如AAV、LVV、RV及OV等)的生產。
在生物工藝流程中,需要使用核酸酶去除終產品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,也需要在生產流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右,包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9,來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,M-SAN HQ中鹽核酸酶pI 8.7左右。因此,在同樣的條件下,從LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底。
基因藥物常用的AAV載體有三種生產方法,分別是三質粒瞬轉體系、桿狀病毒表達載體體系和包裝細胞體系。其中,20多年前開發的三質粒瞬轉表達技術仍然占據腺相關病毒AAV生產的主流地位,其三質粒分別是Helper質粒(含E2a/b、E4和VARNA基因)、目標基因表達質粒及輔助質粒(含Cap和Rep基因)。雖然AAV病毒載體的血清型不同,但AAV的生產流程基本一致,主要有質粒共轉宿主細胞HEK293、293細胞生產病毒顆粒、從細胞培養上清或/及細胞裂解液中收獲病毒載體、純化/制劑/無菌過濾/灌裝等流程。M-SAN HQ ELISA Kit能夠定量檢測M-SAN HQ中鹽核酸酶殘留。
一般來說,生物生產工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商標)為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環狀)的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過E.coli發酵生產得到。該酶的適宜反應條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),且酶活隨著鹽濃度上升而下降,在300mM鹽濃度時酶活幾乎喪失。對于細胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,LV由于含有脂包膜結構一般都在生理鹽條件下存在,而AAV在高鹽條件下不易團聚、更穩定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,Benzonase活性受到抑制。中鹽核酸酶具有純度高(≥99%)、 內毒水平低(<0.25EU/1kU)的特點;徐州70950-202中鹽核酸酶
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這款核酸酶的適宜pH范圍很廣(pH 7.2 - 8.7),且在125 – 250 mM鹽濃度內具有優活性。在細胞培養液或收獲的培養上清中,不需調整任何組分,直接加入M-SAN HQ即可表現良好核酸酶活性。相比傳統的全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,對HCD的去除更高效、更徹底。因此,M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體(如慢病毒、逆轉錄病毒及溶瘤病毒等)的生產。ArcticZymesTechnologies成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。立足北極海洋區,致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶,用于分子研究、體外診斷和zhiliao領域。ArcticZymes專注于與全球的合作伙伴和商業創新者建立牢固可靠的關系。因此,我們一直在高水平工作,不斷滿足并且超過合作伙伴的期望。合肥70960-001中鹽核酸酶