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通心絡(luò)膠囊是心腦血管病常用藥, 句有yi氣活xue, 通絡(luò)止痛的功效。選擇將通心絡(luò)膠囊處理過(guò)的人心肌細(xì)胞 (HCM) 與人心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMECs) 缺氧/復(fù)氧模型共培養(yǎng), 結(jié)果顯示HCMECs的凋亡水平明顯下降, 而加入外泌體抑制劑GW4869后該作用消失, 證明HCM來(lái)源外泌體可作為通心絡(luò)膠囊有效成分的載體。研究者還發(fā)現(xiàn)通心絡(luò)膠囊處理過(guò)的HCM能提高HCMECs中p70s6k1和GSK-3β的磷酸化水平, 說(shuō)明通心絡(luò)膠囊可能通過(guò)HCM來(lái)源的外泌體激huo再灌注損傷挽救激酶通路, 進(jìn)而減少HCMECs的缺氧/復(fù)氧損傷。包載厚樸酚的外泌體比游離厚樸酚有更高的zhiliao功效,可改善細(xì)胞攝取從而提高抗中流功效。海南鐵死亡與外泌體載藥
外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養(yǎng)外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過(guò)透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養(yǎng)。凍融循環(huán)法是經(jīng)過(guò)冷凍、融化過(guò)程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進(jìn)入外泌體中,擠出法利用擠出機(jī)實(shí)現(xiàn)外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點(diǎn):孵育法操作簡(jiǎn)單,但載藥量低;凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法對(duì)儀器的要求高,且可能會(huì)破壞外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)造成藥物泄露,終造成載藥量不理想。吉林細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用裝載紫杉醇的外泌體靶向給藥系統(tǒng)通過(guò)微流控技術(shù)純化后可用于抗中流zhiliao。
外泌體遞送系統(tǒng)的靶向給yao方式分為被動(dòng)靶向和主動(dòng)靶向兩種。被動(dòng)靶向給藥,多采用局部給yao方式實(shí)現(xiàn),包括局部注射、鼻腔給藥、生物材料局部植入等。主動(dòng)靶向給藥的相關(guān)研究很少見。jin有YUAN等人利用血一腦屏障在病理和生理?xiàng)l件下的特性,實(shí)現(xiàn)載帶腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的外泌體遞送系統(tǒng)在全身給藥條件下腦部主動(dòng)靶向。因被動(dòng)靶向的靶向效率明顯低于主動(dòng)靶向,且臨床實(shí)際更需要的是可以實(shí)現(xiàn)精zhun靶向給藥、減少非靶組織和qi官傷害的主動(dòng)靶向給藥,故載帶外源性蛋白質(zhì)外泌體主動(dòng)靶向給藥將是研究的主要方向。
phil作為連翹的主要藥效成分之一,具有廣fan藥理作用,但極性較小、滲透性差、體內(nèi)吸收較差、代謝較快,phil可促進(jìn)肺中流組織中endostatin的表達(dá),下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá),共同抑制中流xue管的生成。以磷脂和膽固醇為載體將phil制備成脂質(zhì)體納米粒,增強(qiáng)了phil的抗氧化活性,緩釋性增強(qiáng);采用聚山梨酯-80將揮發(fā)油和phil制成納米膠束,提高了phil的溶解度,增強(qiáng)了phil的透皮吸收。用外泌體作為藥物載體,制備一種負(fù)載連翹苷的外泌體遞藥系統(tǒng)(phil-exo)。制備的phil-exo被A549細(xì)胞攝取良好,對(duì)A549細(xì)胞遷移具有較高抑制作用,明顯提高phil的抗中流細(xì)胞遷移能力,這可能是由于細(xì)胞分泌所得外泌體粒徑極小易于透過(guò)細(xì)胞,有助于改善phil的難以滲透細(xì)胞膜和不穩(wěn)定性。外泌體載阿霉素在小鼠體內(nèi)的耐受量高于游離的阿霉素,增加了阿霉素對(duì)乳腺ai和卵巢ai的zhiliao指數(shù)。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——超高速離心法。其中超高速離心法是常用的,該方法是被譽(yù)為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。因操作簡(jiǎn)單,不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,并且成本相對(duì)較低而被廣fan使用。但是該方法耗時(shí)、產(chǎn)率低,得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,其中主要的問(wèn)題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會(huì)有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。所以得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都不高。ai細(xì)胞的外泌體優(yōu)先與其親本ai細(xì)胞融合,具有靶向母體ai癥的特點(diǎn),可作為有效的載體包載藥物。安徽超聲外泌體載藥
使用ADSC外泌體裝載姜黃素可增強(qiáng)抗肝ai的效應(yīng)。海南鐵死亡與外泌體載藥
大分子蛋白類藥物可以通過(guò)以下方法進(jìn)行外泌體載藥。Haney等人采用常溫下共孵育、加入皂素后孵育、反復(fù)凍融、超聲、擠出等多種不同的方法將過(guò)氧化氫酶包載到外泌體中。結(jié)果顯示,外泌體通過(guò)超聲和擠出兩種方式句有較高的載藥量,分別為26.1%和22.2%,通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散方式的載藥量jin為4.9%,但當(dāng)加入句有透皮促進(jìn)作用的皂素后,外泌體的載藥量會(huì)明顯提高至18.5%。值得注意的是,外泌體的載藥量不jin與載yao方式有關(guān),也取決于藥物的性質(zhì)、外泌體脂質(zhì)的組成,而且不同的載yao方式也會(huì)影響細(xì)胞對(duì)外泌體的攝取。海南鐵死亡與外泌體載藥