中流細胞的異常增殖和高遷移水平是惡性中流細胞發生轉移的重要特征。通過實驗可以用含藥外泌體DATS-Exo、空白外泌體Exo和DATS處理B16BL6細胞24h后,然后采用MTT的方法檢測細胞的增殖活性。實驗結果顯示,DATS-Exo與DATS都能夠有效抑制B16BL6細胞的增殖,且與DATS組相比,DATS-Exo的抑制作用更強。通過經典的劃痕法考察含藥外泌體DATS-Exo的抑制中流細胞水平遷移能力,DATS-Exo組與DATS組相比具有更強的抑制效果。實驗結果表明,將大蒜素DATS制備成外泌體載藥系統是可以明顯提高其體外抗中流細胞轉移的能力。樹突細胞分泌的外泌體表面會表達出CD9,有利于加強外泌體與靶細胞的融合,提高外泌體對藥物運輸的效率。河北外泌體載藥的方法
為考察裝載藥物的外泌體DATS-Exo在體內抑制中流轉移的情況,將肺轉移小鼠黑色素瘤中流細胞通過尾靜脈注射入C57BL/6小鼠體內,建立實驗性肺轉移小鼠模型并通過腹腔注射給予DATS-Exo及DATS。結果顯示,造模后,H&E染色發現模型組小鼠與正常組相比,肺部發生了嚴重的轉移,體現在模型組小鼠肺部出現了較多的中流結節數目和較大的中流體積。不論是DATS組還是含藥外泌體DATS-Exo組均表現出一定的抑制中流轉移的效果,而與DATS組相比,裝載了DATS藥物的外泌體載藥系統能更好地抑制中流的肺轉移,減少中流結節數目,降低異常的肺重量,具有更優的抗中流轉移作用。黑龍江動物細胞樣本外泌體載藥大概費用外泌體載藥中外泌體提取的方法可聯合使用各種方法,從而得到高純度和高產量的外泌體。
多烯紫杉醇(docetaxel,DTX)是漿果紫杉針葉的提取物,屬于紫杉類抗中流藥物,用于乳腺ai、卵巢ai、非小細胞肺ai、前列腺ai等多種實體中流的zhiliao。多烯紫杉醇為脂溶xing藥物,難溶于水,目前臨床使用的多烯紫杉醇注射液使用吐溫-80、乙醇作為增溶劑增加溶解度,其不良反應較大,臨床應用受到很大的限制。采用電穿孔法將DTX裝載至外泌體中(DTX-EXO)。通過體外釋放實驗結果表明DTX-EXO在正常體液環境和中流環境句有一定的緩釋性能,在正常體液環境下能緩慢釋放,在中流部位則釋放速度加快,有利于減少細胞在正常組織中的毒副反應,增加中流部位的藥效。
外泌體也可作為蛋白類藥物的載體用于疾病的zhiliao。Haney等人將包載過氧化氫酶的外泌體用于帕金森疾病的zhiliao。實驗結果表明,超聲是將過氧化氫酶包載到外泌體中的jia方式,能有效地避免過氧化氫酶的降解。體內研究結果顯示,包載過氧化氫酶的外泌體能明顯地降低大腦黑質致密部中炎癥因子CD11b的表達,該組中多巴胺神經的數量比對照組高3倍,說明它能有效地保護多巴胺神經,防止其退化。目前已有研究報道,外泌體自身攜帶的蛋白類物質同樣可以用于疾病的zhiliao。間充質干細胞外泌體可遞送突變型HIF-1α更好地恢復類固醇誘導的早期股骨頭缺血性壞死。
抗ai癥藥物——阿霉素(DOX)已經成功被載入外泌體中,并對其抗中流作用進行了研究。在運輸DOX的研究中,Wei等選擇了已經在臨床上使用的未成熟的樹突細胞作為母代細胞,通過化學轉染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b,這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結合,使外泌體對DOX的運輸句有靶向性。將對iRGD肽靶向的外泌體和未經靶向性處理的外泌體用DiR染料標記,并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細胞的小鼠體內,觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經出現在中流組織處,在注射2h后外泌體的含量高,而未經靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟,幾乎很少到達中流組織處,說明對iRGD肽靶向的外泌體句有很好的靶向性。抗中流藥物運輸載體對中流的靶向性至關重要,靶向性強的載體可以大限度地把藥物運輸到中流處,發揮藥物的作用。負載DOX的iRGD肽靶向性外泌體對中流的抑制效果遠優于單純的DOX。外泌體載藥后可以繞開P-糖蛋白,明顯降低藥物進入細胞后的外排作用。寧夏鐵死亡與外泌體載藥
間充質干細胞外泌體既有作為載藥載體的特性,還有MSC的多種生物學功能,本身也可以作為“藥物”使用。河北外泌體載藥的方法
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統中應用——超高速離心法。其中超高速離心法是常用的,該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。因操作簡單,不需要復雜的技術支持,并且成本相對較低而被廣fan使用。但是該方法耗時、產率低,得到的外泌體的數量和質量很大程度上受轉子的類型、轉子沉降角度等因素影響,其中主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會有其他的囊泡、蛋白質或蛋白和RNA的聚集體。所以得到的外泌體的純度和產量都不高。河北外泌體載藥的方法