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浙江細胞樣本外泌體載藥實驗服務

來源: 發布時間:2022-06-25

天然來源的外泌體含有眾多內源性脂質、蛋白及核酸類物質,其自身句有一定的成藥潛力,例如間充質干細胞來源的外泌體在組織修復領域獲得了巨大成功。當外泌體用作遞送載體時,一般還需人為裝載藥物。理想的載yao方法不jin要實現較高的載藥效率,還應保留外泌體和藥物的功能和完整性。目前,在不破壞外泌體膜完整性的情況下將藥物有效載入到外泌體中仍是一個巨大挑戰。現有的載yao方法可分為分泌前載藥法和分泌后載藥法。分泌前載藥法通常將親代細胞與藥物共孵育(一般需要加轉染試劑),使藥物進入細胞質,細胞質中的藥物通過主動或被動的方式被分選到外泌體中,然后通過合適的提取方法即可獲得載藥的外泌體。分泌后載yao方法是目前常用的外泌體載藥策略,通常需要先分離提純外泌體,再將藥物載入其中。連翹酯苷A制備成外泌體載藥系統可明顯提高其體外抗中流細胞轉移的能力。浙江細胞樣本外泌體載藥實驗服務

外泌體載藥系統一直是眾多研究者關注的焦點。SUN等人在早期的動物實驗中對脂多糖(LPS)誘導的膿毒性休克小鼠模型進行腹腔注射含姜黃素的外泌體。結果表明,外泌體可用作kang炎藥物的體內載體。自此,揭開了外泌體介導藥物傳遞系統研究的新篇章。他們改用鼻腔內注射,結果發現,載有姜黃素或信號傳導與轉錄激huo因子3抑制劑的外泌體可用于zhiliaoLPS誘導的腦炎癥、實驗性自身免疫性腦炎和GL26腦中流模型。隨后又有研究者發現,向野生型小鼠靜脈注射攜帶小干擾核糖核酸序列的外泌體,能明顯抑制阿爾茨海默病zhiliao靶點β-淀粉樣前體蛋白裂解酶1的表達。福建組織樣本外泌體載藥實驗價格比較裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細胞攝取。

大分子蛋白類藥物可以通過以下方法進行外泌體載藥。Haney等人采用常溫下共孵育、加入皂素后孵育、反復凍融、超聲、擠出等多種不同的方法將過氧化氫酶包載到外泌體中。結果顯示,外泌體通過超聲和擠出兩種方式句有較高的載藥量,分別為26.1%和22.2%,通過被動擴散方式的載藥量jin為4.9%,但當加入句有透皮促進作用的皂素后,外泌體的載藥量會明顯提高至18.5%。值得注意的是,外泌體的載藥量不jin與載yao方式有關,也取決于藥物的性質、外泌體脂質的組成,而且不同的載yao方式也會影響細胞對外泌體的攝取。

在藥物遞送系統中,理想的載體應該是安全、有效,并且有很好的生物利用度。同時,載體的穩定性,低的細胞毒性和免疫原性,以及能否成功地將藥物運送到特定的組織或細胞也是至關重要的。外泌體作為藥物遞送系統具有一系列的優點:(1)從患者的組織或血液收集(如骨髓、單核細胞或巨噬細胞)的外泌體,載藥后可以逃避單核吞噬細胞系統(MPS)的qing除,從而減少藥物的qing除率。(2)外泌體具有潛在的靶向性,可以增加藥物輸送到靶組織的能力[10]。(3)外泌體膜的特定脂質體和蛋白質,使得外泌體可以直接與靶細胞膜融合,從而明顯提高藥物進入細胞的可能性。(4)外泌體載體可以避開內吞途徑的內化,而且外泌體的安全性在許多臨床試驗已經得到證實。外泌體裝載PTX,磷脂雙分子層可直接靶向融合細胞,增加PTX的細胞內化量,提高藥物zhiliao效果。

小分子siRNA、miRNA常作為基因zhiliao的核酸藥物,但其穩定性差,極易被體內的酶降解,限制了它在臨床中的運用。而外泌體的脂質雙分子層結構可以保護基因類藥物,避免其降解。其次,外泌體能通過膜融合的方式直接將包載的基因類藥物釋放到受體細胞中,實現更高的投遞效率。許多研究證明外泌體能成功遞送小分子siRNA、miRNA。通過體外實驗證明,來源于血漿的外泌體可以有效地傳遞siRNA到單核細胞和淋巴細胞,使MAKP1基因沉默。利用類似的方法遞送RAD51- siRNA和RAD52-siRNA到HELA細胞和纖維素肉瘤細胞中從而誘導兩個基因的沉默,研究證明RAD51基因的沉默可以造成中流細胞大量的凋亡,因而通過外泌體負載siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有廣闊的前景。將姜黃素裝載到cRGD外泌體上,外泌體的施用對病變區域的炎癥反應和細胞凋亡具有強烈的抑制作用。天津外泌體載藥參考價格

負載姜黃素的外泌體能促進抗精神類藥物作用下的細胞膽固醇外流, 減少因藥物不良反應造成的細胞內脂質沉積。浙江細胞樣本外泌體載藥實驗服務

外泌體載yao方法已在多種研究中得到應用,但各自有一定的局限性:共孵育依賴藥物跨膜運輸而包載;超聲法和電穿孔法較為常用,但都破壞了外泌體的膜結構而使藥物進入外泌體,與參數有較大關系;擠壓法依賴儀器的機械力,但機械力是否對外泌體產生影響未知;反復凍融法載藥能力較差;對外泌體修飾可以達到提高細胞攝取或者靶向而改善藥物的療效;藥物混合物中加入皂苷會有體內溶血的潛在風險。目前研究者應用較多的方法是共孵育結合超聲、超聲、電穿孔、修飾外泌體。浙江細胞樣本外泌體載藥實驗服務

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