外泌體的提取方法在外泌體載藥系統中應用——尺寸排阻色譜法。尺寸排阻色譜法時外泌體提取的一種方法,利用分子篩理論,開始是根據蛋白質分子大小分離蛋白質的色譜技術。該方法的主要優點是不需要很大的離心力,從而保證了外泌體的完整性。對比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結果顯示, 尺寸排阻色譜法得到的外泌體的蛋白豐度高于超高速離心法。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規模的生產和臨床應用提供了可能。超濾也是根據外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法,超濾一般被認為是外泌體分離過程中的一個準備過程,通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質。不過連續的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,超濾不需要特殊的設備就可以較短時間內分離出外泌體。但是,超濾膜對外泌體的黏附作用會降低外泌體的產量,并且超濾過程中施加的外力可能會使外泌體變形或者破裂。在中風大鼠中,裝載豐富miR-133b的間充質干細胞外泌體能促進星形膠質細胞釋放外泌體。上海動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用
采用外泌體可以有效地包載藥物,提高藥物的生物利用度。而且對外泌體進行必要的修飾,可以使藥物準確靶向到中流部位,從而降低藥物的毒副作用。目前多種不同形式的外泌體已經被研究開發裝載小分子藥物用于中流疾病的zhiliao。Tian等利用未成熟樹突狀細胞衍生的外泌體負載DOX并靶向遞送藥物到中流組織中。體外細胞實驗表明,負載DOX的iRGD靶向肽外泌體(iRGD-EXOs-DOX)殺死了多達80%的乳腺ai細胞,幾乎與游離DOX對照組相當。體內實驗證明,iRGD-EXOs-DOX在荷瘤小鼠體內句有良好的靶向性,能準確定位到中流組織,明顯抑制中流的生長,同時極大地降低了DOX對心臟的毒性。廣西外泌體載藥原理裝載連翹苷(phil)的MHS來源外泌體對A549細胞遷移能力有較為明顯的抑制作用。
有實驗將an-timiR-9載入到間充質干細胞中,使其分泌的外泌體包載有an-timiR-9。通過體外細胞傳遞實驗發現,間充質干細胞可以通過外泌體遞送an-timiR-9到耐藥性多形性膠質細胞瘤(GBM)中,致使耐藥性細胞株中的MDRI基因下調,P-糖蛋白表達量減少,從而增加耐藥性細胞株對替莫唑胺的化學敏感性,有效地抑制耐藥性多形性膠質細胞瘤的增殖。研究人員采用外泌體對GBM進行zhiliao不只停留在細胞實驗上,相關的體內研究也已有報道。研究者將高表達miR-146b間充質干細胞源性的外泌體用于zhiliaoGBM的移植瘤模型中,結果表明載有miR-146b的外泌體能有效地抑制中流的生長。
以解決臨床問題而設計的句有靶向運輸性能的外泌體可有效的包裹化療藥物洛鉑。在探針合成表征水平上,合成后的靶向運輸載體句有形態穩定,粒徑大小適宜的特性,并能安全有效的裝載化療藥物洛鉑。合成的靶向運輸載體能夠有效的被細胞攝取并在細胞水平上發揮zhiliao作用;能夠通過血管間隙進入到中流實質中發揮作用;能夠通過iRGD的引導到達中流部位;并且在有效的提高化療藥物洛鉑的zhiliao作用的同時,可明顯的降低化療藥物洛鉑的毒副作用。這一技術有望解決臨床上化療藥物洛鉑在頭頸ai疾病zhiliao中的應用受限問題。在小鼠模型中利用外泌體裝載姜黃素和過氧化氫酶可證明其在神經保護方面的作用。
甲狀腺ai(thyroidcarcinoma)是一種常見的內分泌惡性中流。在甲狀腺ai的所有亞型中,甲狀腺未分化ai(ATC)的惡性程度很高。目前ATC缺乏有效的zhiliao藥物,屬于難治性惡性中流疾病,傳統的放化療療效差,分子靶向藥物jin對部分基因突變型ATC有效。硬脂酞輔酶A去飽和酶1(stearoyl-CoAdesat urase1,SCD1)是一種脂肪酸合成和代謝的關鍵調節分子,也是催化飽和脂肪酸向單不飽和脂肪酸轉變的限速酶,參與細胞增殖、細胞凋亡等多種生理過程。為研究SCD1與ATC的關系,通過構建鑒定靶向SCD-1的小干擾RNA(siRNA)外泌體,分析以外泌體為載體的靶向SCD-1的RNAi基因zhiliao對ATC細胞存活的影響。細胞存活實驗證明SCD-1-siRNA外泌體可抑制ATC細胞的存活,促進細胞凋亡。這一結果說明SCD-1-siRNA外泌體具有zhiliaoATC的巨大潛力。外泌體裝載姜黃素的穩定性和kang炎特點,可將其運用于腦部炎癥的zhiliao。吉林外泌體載藥hplc
間充質干細胞外泌體既有作為載藥載體的特性,還有MSC的多種生物學功能,本身也可以作為“藥物”使用。上海動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用
β-欖香烯 (β-ELE) 是從莪術根莖中提取的一種新型的非細胞毒性抗中流藥物, 句有療效確切、低毒等特性, 能通過凋亡途徑抑制肝ai細胞、乳腺ai細胞等多種中流細胞的增殖與遷移, 并能逆轉中流細胞的多藥耐藥性, 增加對化療藥物的敏感性, 但其作用機制尚未完全闡明。目前研究認為第10染色體同源丟失性磷酸酶?張力蛋白基因 (PTEN) 能抑制多種ai癥的發生, 并能增加耐藥細胞對藥物的敏感性。Zhang等人研究顯示, 利用乳腺ai耐藥細胞株與負載β-ELE的外泌體 (50 μmol·L?1/L, 30 h) 共培養, 分析發現負載β-ELE的外泌體上調了耐藥細胞中miR-34a及其靶基因PTEN的表達, 并下調耐藥miR-452和多藥耐藥基因蛋白P-gp的表達, 明顯逆轉了乳腺ai的耐藥性。上海動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用