外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——梯度密度離心法。外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間,因此,可以采用密度梯度離心法來分離外泌體。該方法是將超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結(jié)合,原理是先除去非囊泡物質(zhì),再通過梯度密度濃縮提取外泌體,該方法可以得到相對較為純凈的外泌體。傳統(tǒng)的梯度密度方法通常需要離心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分離出某些確切囊泡,因此,該方法可能不足以沉淀所有的外泌體。如果離心時間不充足,污染物質(zhì)可能和外泌體保持在相同的密度層,特別是這個密度范圍又比較寬。外泌體外源性載yao方式是將外泌體從供體細(xì)胞中分離純化,后將藥物通過適宜的方法導(dǎo)入外泌體內(nèi)實(shí)現(xiàn)載藥。細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)咨詢問價
外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。外泌體作為細(xì)胞-細(xì)胞間交流的“運(yùn)載工句”,外泌體在正常及疾病下都發(fā)揮著不可忽視的功能。利用抗ai癥藥物進(jìn)行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法,目前抗ai癥藥物的運(yùn)載存在著種種挑戰(zhàn),主要體現(xiàn)在:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體qing除,體內(nèi)循環(huán)的半衰期很短等。采用外泌體運(yùn)輸抗ai癥藥物,可以提高藥物體系的水溶性,降低藥物對人體的毒性以及避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉從而延長其循環(huán)時間。安徽動物細(xì)胞樣本外泌體載藥參考價間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體既有作為載藥載體的特性,還有MSC的多種生物學(xué)功能,本身也可以作為“藥物”使用。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——尺寸排阻色譜法。尺寸排阻色譜法時外泌體提取的一種方法,利用分子篩理論,開始是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力,從而保證了外泌體的完整性。對比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結(jié)果顯示, 尺寸排阻色譜法得到的外泌體的蛋白豐度高于超高速離心法。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法,超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過程中的一個準(zhǔn)備過程,通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過連續(xù)的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時間內(nèi)分離出外泌體。但是,超濾膜對外泌體的黏附作用會降低外泌體的產(chǎn)量,并且超濾過程中施加的外力可能會使外泌體變形或者破裂。
有實(shí)驗(yàn)將an-timiR-9載入到間充質(zhì)干細(xì)胞中,使其分泌的外泌體包載有an-timiR-9。通過體外細(xì)胞傳遞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),間充質(zhì)干細(xì)胞可以通過外泌體遞送an-timiR-9到耐藥性多形性膠質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)中,致使耐藥性細(xì)胞株中的MDRI基因下調(diào),P-糖蛋白表達(dá)量減少,從而增加耐藥性細(xì)胞株對替莫唑胺的化學(xué)敏感性,有效地抑制耐藥性多形性膠質(zhì)細(xì)胞瘤的增殖。研究人員采用外泌體對GBM進(jìn)行zhiliao不只停留在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上,相關(guān)的體內(nèi)研究也已有報道。研究者將高表達(dá)miR-146b間充質(zhì)干細(xì)胞源性的外泌體用于zhiliaoGBM的移植瘤模型中,結(jié)果表明載有miR-146b的外泌體能有效地抑制中流的生長。外泌體可以包載疏水性的姜黃素,提高其溶解度、穩(wěn)定性和體內(nèi)生物利用度。
平陽霉素對多種ai細(xì)胞有有效的抑制作用。使用乳腺ai來源的外泌體裝載平陽霉素作用于乳腺ai中流干細(xì)胞,觀察其對乳腺ai中流干細(xì)胞活力和侵襲能力的影響。結(jié)果表示,隨著平陽霉素濃度增加,細(xì)胞活力逐漸下降,并且搭載平陽霉素外泌體對細(xì)胞活力的抑制作用更佳。相比于直接用平陽霉素處理細(xì)胞,用外泌體裝載的平陽霉素對乳腺ai中流干細(xì)胞的細(xì)胞活力具有更好的抑制效果。因此,載藥外泌體具備有效降低乳腺ai中流干細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的潛力。裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體無論是4℃還是37℃在1周內(nèi)可以穩(wěn)定存在。黑龍江細(xì)胞樣本外泌體載藥咨詢問價
間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體能通過裝載miR-132zhiliao心肌缺血。細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)咨詢問價
姜黃素是姜黃類植物中含有的一種多元酚, 它句有kang炎、抗氧化應(yīng)激及抑制惡性中流細(xì)胞增殖等廣fan的藥理作用。在臨床應(yīng)用中, 其水溶性較差, 有效成分利用率偏低。研究發(fā)現(xiàn), 利用外泌體作為姜黃素的藥物載體, 姜黃素在體內(nèi)的濃度、藥物穩(wěn)定性隨之增加, 提高了藥物療效并且沒有明顯的不良反應(yīng)。在體外研究中, 利用腸道Caco-2細(xì)胞模型模擬人體消化過程, 發(fā)現(xiàn)利用牛奶來源外泌體作為姜黃素載體, 可以明顯提高其溶解度, 增加腸道細(xì)胞攝取率, 進(jìn)而降低因消化過程造成的有效成分的降解, 提高生物利用度。細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)咨詢問價