外泌體載藥系統中外泌體提取的方法有很多種,有差速超高速離心法、超濾法、試劑盒提取方法、磁珠免疫法等,但單一外泌體分離方法都有其不可解決的弊端,而聯合不同的分離方法可得到更純凈、更豐富的外泌體。在裝載連翹酯苷A(FTA)的外泌體遞藥系統的功效中的研究中,采用了差速離心法和超濾法提取外泌體,先使用超濾管濃縮細胞上清液,富集外泌體,再使用超高速離心提取外泌體,縮減了離心次數和時間,提高了外泌體提取效率,且整個過程簡單易操作。同時采用低溫超聲孵育的方法制備FTA-Exos遞藥系統。載帶茚地那韋的外泌體給藥系統用于ai滋病相關神經系統疾病的zhiliao。福建外泌體載藥紫杉醇
外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養。凍融循環法是經過冷凍、融化過程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進入外泌體中,擠出法利用擠出機實現外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點:孵育法操作簡單,但載藥量低;凍融循環法、超聲法和擠出法對儀器的要求高,且可能會破壞外泌體的質膜結構造成藥物泄露,終造成載藥量不理想。江西細胞樣本外泌體載藥價格比較口服遞送裝載紫杉醇(PAC)的外泌體作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生長明顯受到抑制。
靜脈注射修飾RVG神經元靶向肽的外泌體能透過血腦屏障,用于阿爾茨海默癥的zhiliao。Alaarez-Erviti等通過基因工程技術使DC細胞分泌的外泌體膜上連接一個特異性RVG神經元靶向肽,從而使包載siRNA的外泌體順利地靶向到腦中特定的神經細胞。研究結果顯示,負載siRNA的RVG-EXOs可以使阿爾茨海默癥相關BACE1mRNA下調61%,蛋白表達下調62%,明顯降低β-淀粉樣肽1-42水平。之后,COOper等利用相同的技術遞送α-突觸核dan白siRNA到轉基因模型鼠中,致使大鼠中腦、紋狀體、皮質層區域mRNA水平分別下調49%、56%、50%,相應的α-突觸核dan白水平下調32%、26%、30%,而且能有效地抑制中腦區域α-突觸核dan白的聚集,展示了外泌體用于腦部疾病zhiliao的巨大潛力。
外泌體載藥系統一直是眾多研究者關注的焦點。外泌體作為細胞-細胞間交流的“運載工句”,外泌體在正常及疾病下都發揮著不可忽視的功能。利用抗ai癥藥物進行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法,目前抗ai癥藥物的運載存在著種種挑戰,主要體現在:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體qing除,體內循環的半衰期很短等。采用外泌體運輸抗ai癥藥物,可以提高藥物體系的水溶性,降低藥物對人體的毒性以及避免被網狀內皮系統捕捉從而延長其循環時間。外泌體裝載小分子藥物的方法有很多,主要有被動孵育、超聲、電穿孔及供體細胞載藥等。
外泌體來源于機體細胞,可作為天然的生物載體,能進行長距離的細胞間物質輸運和信號傳遞。這種細胞間的通訊在機體的生理和病理過程中至關重要,已被用于多種疾病和中流的zhiliao與組織損傷修復等疾病的研究。主要方法分為 2種:一是某些特殊細胞分泌的外泌體包含有zhiliao作用的有效分子,可將外泌體作為生物藥物應用于免疫抑制和活化、血管生成以及組織損傷修復等;另一則是利用工程化改造后的外泌體作為藥物載 體將zhiliao藥物運送至zhiliao部位。在小鼠模型中利用外泌體裝載姜黃素和過氧化氫酶可證明其在神經保護方面的作用。河北整體實驗外泌體載藥實驗價格比較
對于水溶性的藥物可用電穿孔的方法將藥物載入外泌體中。福建外泌體載藥紫杉醇
研究證明了外泌體運載siRNA進行RNAizhiliao的潛力。在他們的研究中,首先通過化學轉染法將RAD51siRNA裝載入源于HeLa細胞和腹水的外泌體,隨后在體外成功地將siRNA運輸至目標細胞。結果顯示,這種外泌體負載RAD51siRNA的抑制效果與直接化學轉染目標細胞的抑制效果相當,但由于化學轉染外泌體后不能將外泌體和轉染劑很好的分離,在應用外泌體時,無法說明是外泌體還是轉染劑在發揮作用。于是研究者又利用電穿孔使RAD51siRNA載入到外泌體中。結果顯示,相比于外泌體與siRNA的混合物(未經載藥處理),經電穿孔載siRNA后的外泌體可以有效抑制RAD51。并且由于RAD51的抑制會帶來人ai細胞的大量死亡,因而通過外泌體運載siRNA的方法在ai癥zhiliao方面有著誘人的前景。福建外泌體載藥紫杉醇