?影響外泌體載藥效率的因素有許多:1外泌體的分離與純化:目前,準確和標準的外泌體純化方法較少,使用不同方法獲得的外泌體其收率與純度差別較大,需要根據研究目的不同選擇適當的分離方法,超速離心法是外泌體純化常用的手段,低速離心和高速離心交替進行的方法通常用于從大量樣品中分離外泌體,但獲得的外泌體純度不高。外泌體的收率過低與低純度會影響其對藥物包載效率,難以實現大批量生產。2包載方法:根據包載藥物的分子極性、相對分子質量及自身所帶電荷等性質選擇不同的包載方法。不同包載方法對于同一種藥物的包載效率可能完全不同。載帶茚地那韋的外泌體給藥系統用于ai滋病相關神經系統疾病的zhiliao。湖北重點項目指南 外泌體載藥
外泌體載藥系統一直是眾多研究者關注的焦點。SUN等人在早期的動物實驗中對脂多糖(LPS)誘導的膿毒性休克小鼠模型進行腹腔注射含姜黃素的外泌體。結果表明,外泌體可用作kang炎藥物的體內載體。自此,揭開了外泌體介導藥物傳遞系統研究的新篇章。他們改用鼻腔內注射,結果發現,載有姜黃素或信號傳導與轉錄激huo因子3抑制劑的外泌體可用于zhiliaoLPS誘導的腦炎癥、實驗性自身免疫性腦炎和GL26腦中流模型。隨后又有研究者發現,向野生型小鼠靜脈注射攜帶小干擾核糖核酸序列的外泌體,能明顯抑制阿爾茨海默病zhiliao靶點β-淀粉樣前體蛋白裂解酶1的表達。福建組織樣本外泌體載藥實驗參考價格小分子抗ai藥物DOX裝載于HEK293T細胞來源外泌體內可用于EL4小鼠淋巴瘤模型的抗ai研究。
phil作為連翹的主要藥效成分之一,具有廣fan藥理作用,但極性較小、滲透性差、體內吸收較差、代謝較快,phil可促進肺中流組織中endostatin的表達,下調血管內皮生長因子(VEGF)表達,共同抑制中流xue管的生成。以磷脂和膽固醇為載體將phil制備成脂質體納米粒,增強了phil的抗氧化活性,緩釋性增強;采用聚山梨酯-80將揮發油和phil制成納米膠束,提高了phil的溶解度,增強了phil的透皮吸收。用外泌體作為藥物載體,制備一種負載連翹苷的外泌體遞藥系統(phil-exo)。制備的phil-exo被A549細胞攝取良好,對A549細胞遷移具有較高抑制作用,明顯提高phil的抗中流細胞遷移能力,這可能是由于細胞分泌所得外泌體粒徑極小易于透過細胞,有助于改善phil的難以滲透細胞膜和不穩定性。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統中應用——免疫親和層析法。利用生物體內存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法,主要用于生物大分子的分離、純化。將其應用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結合,只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別,這使得提取的外泌體純度高,但是產量低。分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法,從血漿和細胞上清中提取外泌體蛋白,結果表明,免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標記蛋白(Alix、CD9、CD63),同時,ELISA和PCR結果也證明了該方法的可行性。外泌體可以包載疏水性的姜黃素,提高其溶解度、穩定性和體內生物利用度。
小分子siRNA、miRNA常作為基因zhiliao的核酸藥物,但其穩定性差,極易被體內的酶降解,限制了它在臨床中的運用。而外泌體的脂質雙分子層結構可以保護基因類藥物,避免其降解。其次,外泌體能通過膜融合的方式直接將包載的基因類藥物釋放到受體細胞中,實現更高的投遞效率。許多研究證明外泌體能成功遞送小分子siRNA、miRNA。通過體外實驗證明,來源于血漿的外泌體可以有效地傳遞siRNA到單核細胞和淋巴細胞,使MAKP1基因沉默。利用類似的方法遞送RAD51- siRNA和RAD52-siRNA到HELA細胞和纖維素肉瘤細胞中從而誘導兩個基因的沉默,研究證明RAD51基因的沉默可以造成中流細胞大量的凋亡,因而通過外泌體負載siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有廣闊的前景。相同劑量的PTX,PTX-M1-Exos載藥體系和游離的PTX相比,對小鼠乳腺ai4T1的抑制率更高。福建外泌體載藥紫杉醇
外泌體載藥中外泌體提取的方法可聯合使用各種方法,從而得到高純度和高產量的外泌體。湖北重點項目指南 外泌體載藥
1. 外泌體作為粒徑納米級的天然囊泡具有介導細胞間信號轉導、抗原呈遞和免疫應答等功能。此外,外泌體還兼具人工合成囊泡的小粒徑、脂溶、穩定、高滲透性和可改造性等特點,通過共孵育等主動載yao方式和超聲法等被動載yao方式可實現外泌體載藥。母乳中富含外泌體,可促進細胞增殖和遷移,減輕炎癥,對新生兒相關疾病 ( 腸炎、過敏、感ran等) 具有保護潛能。通過對母乳外泌體進行表面分子修飾和內容物深度改造后,有望為新生兒疾病提供更加高效、穩定的zhiliao手段。湖北重點項目指南 外泌體載藥